模块五食品中有毒有害成分的.ppt

——激素类药物用于提高动物的繁殖和加快生长发育速度，主要有性激素和皮质激素等。摄入激素残留超标的食品，会影响正常生理机能，并具有一定的致癌性，可能导致儿童早熟、儿童发育异常、儿童异性趋向等。——抗寄生虫类用于驱虫或杀虫，如苯并咪唑，克球酚，吡喹酮等。长期摄入可产生致畸作用和突变作用。第29页,共49页，星期六，2024年，5月2.2.3兽药残留检测畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定——原理：试样经提取，微孔膜过滤后直接进样，用反相色谱分离，紫外检测器检测，与标准比较定量，标准加法定量。——过程：样品测定：称取5.00g(±0.01g)切碎的肉样(＜5mm)，置于50mL锥形烧瓶中，加入5%高氯酸25.0mL，于振荡器上振荡提取10min，移入到离心管中，以2000r/min离心3min，取上清液经0.45μm滤膜过滤，取溶液10μL进样，记录峰高，从工作曲线上查得含量。工作曲线：分别称取7份切碎的肉样，每份为5.00g(±0.01g)，分别加入混合标准溶液0、25、50、100、150、200、250μL(含土霉素、四环素各为0、2.5、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0μg，含金霉素0、5.0、10.0、20.0、30.0、40.0、50.0μg)，按样品测定方法操作、以峰高为纵坐标，以抗生素含量为横坐标，绘制工作曲线。第30页,共49页，星期六，2024年，5月标准加入法：将样品与标准混合后测定吸光度，达到标准与样品基体的相似，因此消除了基体干扰，但它不能消除背景干扰。标准加入法每测定一个样品需要制作一条工作曲线，不适合大批量样品的测定，适合于基体复杂的少量样品测定。第31页,共49页，星期六，2024年，5月3生物毒素检测生物毒素是指生物来源并不可自复制的有毒化学物质，按来源可以分为植物毒素、动物毒素和微生物毒素。植物毒素主要是比如马铃薯中龙葵素、杏仁中氰苷、菜豆中皂苷、黄花菜中秋水仙碱等。动物毒素大多是有毒动物毒腺制造的并以毒液形式注入其它动物体内的蛋白质类化合物，如蛇毒、蚁毒、组胺等。微生物毒素最主要的是霉菌毒素，目前已知的霉菌毒素约有200余种，与食品关系较为密切的有黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、杂色曲霉素等。已知有5种毒素可引起动物致癌，它们是黄曲霉毒素、黄天精、环氯素、杂色曲霉素和展青霉素。第32页,共49页，星期六，2024年，5月黄曲霉毒素(AF)的测定——HPLC法GB/T5009.22-2003食品中黄曲霉毒素B1的测定性质：耐热；溶于氯仿和甲醇，而不溶于水、正己烷、石油醚及乙醚中。第33页,共49页，星期六，2024年，5月高效液相色谱法测定食品中AFTB1、B3、Gl、G2、M1。色谱条件：色谱柱：ODSHypersil；流动相：甲醇+乙腈+水(15+17+68)；流速：1mL／min；检测器：荧光检测器;激发波长360nm，荧光波长440nm；柱温：35℃进样量；35uL。第34页,共49页，星期六，2024年，5月第35页,共49页，星期六，2024年，5月——酶联免疫法测定AFB1酶联免疫吸附法（简称ELISA），始于20世纪70年代。是一种把抗原和抗体的特异性免疫反应和酶的高效催化作用有机结合起来的检测技术。第36页,共49页，星期六，2024年，5月ELISA基本原理（1）利用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接（或建立关联）。（2）通过酶与底物产生颜色反应，用于定量测定。它将酶促反应的高效率和免疫反应的高度专一性有机地结合起来，可对生物体内各种微量有机物的含量进行测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。第37页,共49页，星期六，2024年，5月完整的ELISA试剂盒包含以下各组分：（1）包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）；（2）酶标记的抗原或抗体（标记物）；（3）酶作用的底物（显色剂）；（4）阴性和阳性对照品（定性测定），参考标准品和控制血清（定量测定）；（5）结合物及标本的稀释液；（6）洗涤液；（含吐温20磷酸盐缓冲液）（7）酶反应终止液。（常用硫酸）必需第38页,共49页，星期六，2024年，5月（1）基本原理试剂盒采用间接竞争ELISA方法。此法是测定抗体最常用的方法。将已知抗原吸附于固相载体，加入待检标本(含相应抗体)与之结合。洗涤后，加入酶标抗球蛋白抗体(酶标抗抗体)和底物进行测定。第39页,共49页，星期六，2024年，5月样品中的黄曲霉毒素B1经提取、浓缩后与定量特异性抗体反应，多余的游离抗体(量是一定的)则与酶标板内的包被抗原结合，加入酶标记物和底物后显色，与标准曲线比较测定含量。第40页,