天然产物的提取分离.pptVIP

逆流分溶法（CCD法）多次连续液-液萃取分离过程特点：条件温和，样品易回收，适用于中等极性、不稳定物质的分离。实验室萃取设备：1、分液漏斗2、克雷格逆流分布仪。克雷格逆流分布仪把一系列的分液漏斗有效地排成链，重复进行系列的步骤：振摇（混合）、静置、分离，多次重复，以提高分离的塔板数。液滴逆流色谱（DCCC）液液分配色谱，流动相呈液滴形式垂直上升或下降，通过固定相，实现物质的逆流色谱分配。特点：不易乳化，样品可定量回收，分离效果好，特别适合于分离皂苷等水溶性成分。缺点：样品处理量小。12液滴逆流色谱高速逆流色谱（HSCCC）通过特定的高速行星式旋转所产生的离心力场作用，使无载体支持的液体固定相稳定地保留在蛇形管内，并使流动相单向、低速通过固定相，实现连续逆流萃取分离物质的目的。用于各种物质的分离，包括蛋白质、酶、三萜、生物碱、皂苷等。020304050601固定相极性大，如水、缓冲液等；正向色谱流动相极性小，如氯仿、乙酸乙酯等洗脱顺序：极性小的物质先被洗脱出来。载体：硅胶（含水一般大于17%），硅藻土、纤维素等。分离极性较大或水溶性成分，如苷类、糖、生物碱等。液-液分配柱色谱STEP5STEP4STEP3STEP2STEP1固定相极性小于流动相，如HPLC反相色谱柱、反相薄层色谱板。固定相：硅胶的硅醇基与烷基结合，如RP-2、RP-8、RP-18，亲脂性：RP-18RP-8RP-2流动相（洗脱剂）：MeOH-H2O；CH3CN-H2O洗脱顺序：分离极性大的成分，极性大者先被洗脱出来。反相色谱：液-液分配柱色谱固定相的表面修饰根据物质的吸附性差别进行分离---吸附色谱法吸附分类物理吸附：无选择性吸附，吸附-解吸附发生迅速，吸附剂如硅胶、氧化铝、活性炭等；化学吸附：不可逆吸附，如碱性氧化铝对酚酸性成分的吸附；酸性硅胶对生物碱的吸附等；半化学吸附：聚酰胺对酚酸类、醌类的氢键吸附。吸附原理：相似相吸影响吸附过程的三要素：吸附剂（固定相）溶质（被分离物质）溶剂（洗脱剂、展开剂、流动相）12硅胶、氧化铝极性吸附剂：载样量大，吸附力强硅胶：有中性、酸性之分，适用于各类成分分离。氧化铝：有中性、酸性、碱性之分，不适合于分离酸性成分，多用于分离生物碱。被分离物质吸附力与结构的关系硅胶、氧化铝COOHAr-OHR-OHR-NH2、RNHR’、RNR’R’’RCONRR’RCHORCOR’RCOOR’ROR’RH被分离物质极性大，吸附力强，难洗脱，Rf值小。官能团极性大小排列顺序：溶剂（洗脱剂）的极性与洗脱力的关系01洗脱剂极性越大，洗脱力越强；02硅胶、氧化铝名称RR’黄夹苷ACHO(D-glc)2黄夹苷BCH3(D-glc)2黄夹次苷ACHOH黄夹次苷BCH3H黄夹次苷CCH2OHH黄夹次苷DCOOHH单乙酰黄夹次苷BCH3H单乙酰黄夹次苷BR’’=COCH3, 其它R’’=HSTEP2STEP1极性大→极性小，黄夹苷A黄夹苷B黄夹次苷D黄夹次苷C黄夹次苷A黄夹次苷B单乙酰黄夹次苷B从硅胶柱上被洗脱下来的顺序：极性小的先被洗出，极性大的后被洗出。答案：活性炭----非极性吸附剂分子量大者分子量小者芳香族脂肪族，活性炭和芳香族均有平面型分子的缘故。含OH、COOH、NH2多者少者①吸附力与结构的关系应用活性炭----非极性吸附剂溶剂的洗脱力吡啶15%酚/醇7%酚/H2O醇含水醇H2O黄酮、生物碱的富集，糖的分离，脱色等。聚酰胺（Polyamide）由己酰胺聚合成的一类高分子化合物。分离原理：主要通过酰胺与酚、酸、醌等化合物形成氢键，吸附能力取决于氢键的强弱。聚酰胺吸附能力与化合物结构的关系a.形成氢键的基团数目越多，吸附力越强；4、聚酰胺b.形成分子内氢键者，吸附力减弱；c.分子中芳香化程度高，则吸附性增强；反之，则减弱；1聚酰胺2溶剂洗脱能力强弱3尿素水溶液二甲基甲酰胺甲酰胺NaOH水溶液丙酮甲醇水聚酰胺色谱的应用聚酰胺聚酰胺对一般酚类、黄酮类化合物的吸附是可逆的（鞣质例外），分离效果好，吸附容量大，特别适合于该类物质的制备与分离。也可用于生物碱、萜类、甾体、糖类、氨基酸等其它极性与非极性化合物的分离；聚酰胺对鞣质的吸附特别强，近乎不可逆，特别适合于植物粗提物的脱鞣处理。