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丙酮酸(三碳化合物)乙酰辅酶A柠檬酸α-酮戊二酸琥珀酸辅酶顺乌头酸异柠檬酸丁二酸延胡索酸苹果酸草酰乙酸第一阶段:丙酮酸脱羧脱氢(氧化)第二阶段:三羧酸循环,乙酰CoA的乙酰基被彻底氧化为CO2和H2O(1)丙酮酸氧化反应6葡萄糖的有氧分解是一个完整的过程葡萄糖有O2时分解的总反应式(2)丙酮酸氧化分解的能量从丙酮酸到乙酰CoA及至三羧酸循环,共有5步脱氢得4个NADH+H+和1个FADH2。NADH+H+的一对氢经呼吸链传递给O2得3个ATPFADH2的一对氢传给O2得2个ATP;TCA中还直接得到一个ATP;一个丙酮酸经TCA彻底氧化后产生4×3+1×2+1=15(ATP)。一个葡萄糖(产2个丙酮酸)经EMP、TCA彻底氧化产生的能量是8(EMP)+15×2(TCA)=38(ATP)(3)电子传递体系(呼吸链)与氧化磷酸化分解代谢中,传递氢或电子的酶和辅酶/辅基称为电子传递体系,也叫呼吸链;按照氧化还原电位和电子的传递顺序,电子传递体系中依次有NAD+或NADP+,FAD或FMN,辅酶Q,细胞色素b,细胞色素c1和c,细胞色素a和a3等辅酶或辅基。基质黄素蛋白铁-硫蛋白泛醌细胞色素细胞色素细胞色素还原电位(V)电子传递体系(呼吸链)与氧化磷酸化(续)通过呼吸链将氧化释放的能量传给ADP形成ATP的过程叫氧化磷酸化;传递H或电子是氧化过程;磷酸化是将电子传递时释放的能量通过ATP合成酶使ADP磷酸化生成ATP。Monod方程的参数求解(双倒数法):将Monod方程取倒数可得:或:这样通过测定不同限制性基质浓度下,微生物的比生长速度,就可以通过回归分析计算出Monod方程的两个参数。例:在一定条件下培养大肠杆菌,得如下数据:S(mg/l)63364153221μ(h-1)0.060.240.430.660.70求在该培养条件下,求大肠杆菌的μmax,Ks和td?解:将数据整理:S/μ100137.5192.5231.8311.3S63364153221μmax,=1.11(h-1);Ks=97.6mg/Ltd=ln2/μmax=0.64h典型微生物的生长速度生物生长速率倍增时间μ[h-1][h]E.Coli20.35Yeast0.32.3杂交瘤细胞0.0513.9昆虫细胞0.0611.6酶当底物浓度足够时,酶促反应速率在一定范围内与酶的浓度成正比,当酶浓度很高时,速度曲线逐渐折向平缓.影响酶促反应速率的因素(2)底物浓度当酶的浓度一定而其他条件不变时,酶促反应速率与低底物浓度成正比关系;随着底物浓度的增加,酶促反应速率逐渐趋向一个极限值(vmax)。过量的底物聚集在酶分子上,生成无活性的中间产物,不能释放出酶分子,从而也会降低反应速率。03过量的底物会与激活剂结合,降低了激活剂有效浓度,也会降低酶促反应速率;02高浓度的底物降低了水的有效浓度,降低了分子扩散性,从而降低了酶促反应速率;01当酶浓度足够高,随着底物浓度的升高,酶促反应速率受抑制。(2)底物浓度(续)各种生物酶的最适温度不同;过高或过低的温度会使酶的催化效率降低;最适温度范围内,反应速度最快;最适温度内,温度每升高10度,速度可相应提高1-2倍。温度系数(Q10):温度每升高10℃,酶促反应速率随之相应提高的因数。在1.4~2.0之间,小于无机催化反应和一般化学反应的Q10。3214(3)温度对酶促反应速率的影响温度对酶促反应速率的影响(续)pH反应速度pH对酶反应速度的影响最适pH(4)pH值(4)pH值(续)缓冲剂种类及pH值对酶促反应速率的影响a-乙酸盐;b-柠檬酸盐;c-磷酸盐1、引起底物分子和酶分子的带电状态的改变,从而影响酶和底物的结合2、过高、过低pH会影响酶的稳定性,进而遭到不可逆性的破坏分类酶时间时间添加基质添加化合物如氨基酸01持续的细胞或酶的浓度02可诱导的细胞03可抑制的时间激活剂:引起酶的催化活性或强化催化活性的物质激活作用:酶促反应只有当某一种适当的物质存在时,才表现出酶的催化活性或强化其催化活性,该性质叫对酶的激活作用。无机阳离子无机阴离子有机化合物(5)、激活剂不可逆抑制是与酶蛋白结合后很难自发分解、不能用透析法除去的抑
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