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药物分析新实验
微流控芯片分析法
测定赖氨酸颗粒剂中的赖氨酸含量
在电场作用下,溶液表面正电荷带动溶液整体移动,形成电渗流-----------------------------+++++++++++++++++++++++++++-+++++++++++++EOF+++++++++++++一.实验原理毛细管电泳原理pH2.5的碱性或弱酸性溶液中,毛细管内表面Si-OH基电离而带负电荷,固-液介面形成双电层,溶液表面带正电
混合组分随电渗流移动,各组分因淌度及分配行为等差异,迁移速度不同中性分子+---------------------------------------------+++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++毛细管电泳原理一.实验原理
分析芯片:进样通道分离通道缓冲液池一.实验原理
微流控分析芯片进样通道分离通道检测器-+进样电压+-分离电压进样与分离一.微流控芯片分析芯片
非接触电导(CCD)检测原理:高频信号记录接收放大electrodesmicrochannelschipreservoirsContactlessConductivityDetectorforMicrofluidicChip一.实验原理根据背景溶液与被测物电导差别进行定量检测,极性和离子组分都能检测。优点:电极不与溶液直接接触,消除电极污染,降低背景噪音。
清洗芯片后全部注入缓冲液,通道无气泡。打开高压电源,迅速按到分离,将分离电压调至2kV。然后调到待机。样品池注入样品溶液,四个池中液面高度相同,盖上电极。切换至进样,数30s后切换至分离电压。重复进样分离操作六次。保存谱图,记录数据,注意有效数字的取舍。用缓冲液平衡5min后可测下一浓度。二.实验操作
注意事项1、处理芯片时应每次用指定的溶液浸润2min后,用真空泵抽动补液。活化与检测时务必保证通道无气泡(清洗活化过程中,从一个孔道真空抽气,同时保证另外三个孔道注满液体。加样时保证另外三个孔道注满缓冲溶液)2、盖板打开应反放,不要碰歪电极。3、高压电源输出电流在安全范围,但仍须谨防身体接触高压电极。4、注意针头不要刺伤身体和芯片5、实验完毕要用0.2MHNO3洗通道15min,水清洗通道5min,然后在用水充满,盖住芯片,以防灰尘侵入。液体不要漏出芯片外!
三、实验内容标准溶液或样品溶液迁移时间峰面积或峰高第1次进样第2次进样第3次进样平均值1.00×102mg/L赖氨酸2.00×102mg/L赖氨酸4.00×102mg/L赖氨酸6.00×102mg/L赖氨酸8.00×102mg/L赖氨酸10.00×102mg/L赖氨酸赖氨酸样品溶液每位同学至少负责一个点,最后制作标准曲线,求得赖氨酸含量。
软件使用:1.出峰时间2.峰高或峰面积:负峰积分倒转峰→禁止判峰→手动添加峰→右键峰尺寸
实验结果:1.峰面积-浓度标准曲线(看原始数据,回去以后再打印贴上)2.峰形图(手画,标明峰的归属和迁移时间的计算方法)实验结束后:硝酸洗15min,水洗10min,最后用水浸润芯片,盖上盖板。所有注射器的针头用盖子盖好
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