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职业教育医学生物技术专业教学资源库降解噬菌体核酸噬菌体疗法概论
CRISPR-Cas系统CRISPR-Cas系统是降解噬菌体核酸、免疫噬菌体入侵的一个重要“武器”,是一种“获得性”免疫系统。1987年,Ishino及其同事在对大肠埃希菌的iap基因进行测序时,在该基因的3端偶然发现了一种特殊的重复序列结构。2002年起正式使用“CRISPR-Cas”
CRISPR-Cas系统 (一)CRISPR-Cas系统的结构CRISPR位点:Cas蛋白:含有21~48bp的正向重复序列(repeat)含有回文结构有长度相似的21~72bp的非重复性间隔序列(spacer)CRISPR位点的5端一般还有一段高AT含量的前导序列(leadersequence)。CRISPR位点邻近4~20个的cas基因,这些cas基因表达一整套Cas蛋白发挥核酸酶、解旋酶、聚合酶及RNA结合蛋白等功能。
(二)CRISPR-Cas系统降解噬菌体核酸的机制适应阶段:识别前间隔序列,“记忆存储”表达阶段:干扰阶段:CRISPR-Cas系统“秒杀任务”较长的前CRISPRRNA(pre-crRNA)被剪切成较短的成熟crRNA,Cas蛋白的表达与储备形成CRISPR-Cas复合物识别噬菌体DNA被切割或干扰
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