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植物细胞的信号传导.pptVIP

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小G蛋白基因的克隆1989年Matsui等从拟南芥中克隆了第一个植物小G蛋白基因—ara,随后人们已克隆了几十种小G蛋白的基因,如豌豆13个,拟南芥12个。但还未发现植物细胞中有类似动物中的ras小G蛋白,这可能说明植物与动物对环境信号有不同的感知反应,因而动植物参与信号转导的蛋白(G蛋白)在分子结构上与动物有所差异。G蛋白在植物细胞信号转导中的作用光信号转导经红光或远红光处理后,浮萍蛋白提取物对GTP的结合活性降低20%,而照射蓝光却没有结果。暗示一种或几种G蛋白可能参与了红光信号的转导。12离子通道武维华等人1994年利用膜片钳(Patch-clamp)技术,研究G蛋白调节剂对蚕豆保卫细胞原生质体质膜上单离子K+通道的影响,发现GTPγS,CTX和PTX均抑制K+内流,而GDPβS促进K+内流。这是证明G蛋白可以调节植物中离子通道的直接证据。植物激素信号转导

Zaina1990年发现IAA可以促进GTPγS与水稻胚芽鞘膜泡组分的结合以及膜泡组分中GTPase活性的增加。Borachov等1994年发现经GTPγS和CTX处理以后,蝴蝶兰花对乙烯的敏感性增强,乙烯处理后凋谢时间明显缩短,花受粉以后,随乙烯生成量的增加,花瓣质膜组分对[35S]GTPγS的结合活性也明显增加,但GDPβS处理不影响花对乙烯的敏感性.病原信号转导

Bolwell等1991年发现PTX和CTX可以增强菜豆悬浮培养细胞对真菌病原激发子(fungalelicitor)的反应能力。Kawakita等1994年发现真菌病原激发子能促进马铃薯块茎微粒体结合GTPγS的活性,并引起该微粒体GTPase活性增加。暗示G蛋白可能参与植物病原信号转导。其他生理过程

GPα1在活跃增殖的细胞以及开始进行分化的细胞中水平较高,而在已经分化成熟的细胞中水平较低;在已分化的组织,维管束组织、心皮壁及长角果壁中水平较高,而这些组织均与营养物质的运输有关。GPα1可能具有以下功能:

调节细胞分裂与分化;

调节细胞对营养物质的吸收。植物叶绿体的蛋白组分有些是由核基因编码的,这些蛋白质在胞质中合成后需跨叶绿体膜运输到叶绿体内部定位组装.已知这些蛋白先以前体形式合成,前部有一段导肽,导肽与叶绿体外膜表面或类囊体外面的蛋白识别后进入叶绿体内部,但有关这些蛋白跨膜运输的机制还不清楚.Schnell等1994从叶绿体外膜上分离得到了定位于外膜上的与前体蛋白运输有关的4种蛋白质,其中1种鉴定为热激蛋白HSP70,1种可能是通道蛋白,另2种蛋白与其它G蛋白有同源的结合GTP的保守区域,它们的功能可能是以结合并水解GTP的方式直接与前体的导肽相互作用,或以调节肽与其它转运介导结合蛋白之间相互作用的方式,来调节蛋白前体跨膜向叶绿体内部运输.(以上的结果均是体外实验研究获得)

转基因植物功能分析(functionalanalysisoftransgenicplant)02在体内研究植物G蛋白功能的分子生物学方法01一般方法是在植物中导入某种G蛋白的反义RNA、或使蛋白超表达或异位(ectopic)表达后,检测这种处理对植物生长发育的影响。Kanada等1992年将水稻rgp1基因(一种小G蛋白基因)按反义顺序转入烟草细胞中,发现顶端优势减弱,出现矮化表型,花的外形也不正常。由于已知顶端优势是由细胞分裂和生长素二者的平衡决定的,花的正常发育也需要各种激素的平衡,表明rgp1基因产物可能参与了激素控制的顶端优势及花的分化。酵母突变体功能互补01利用功能缺失互补。研究小G蛋白较有效,因其较保守。但研究异三聚体G蛋白是不适宜的。02已知一酵母株系是缺乏与所要证实的植物某一蛋白功能同源的蛋白的突变体,将已克隆的该植物蛋白cDNA导入该酵母寄主细胞中,检测导入后是否能互补(恢复)该突变体酵母的功能.其先决条件是:要求该植物蛋白与酵母对应蛋白有较高的同源性,即寄主植物的蛋白要能够在酵母中得到表达,且该酵母基因突变而自身已不再能够表达该蛋白.受体蛋白激酶(receptorproteinkinase,RPKs):为一种跨膜受体。胞外部分与配基(ligand)相识别,胞内部分具内源的蛋白激酶活性,并依赖其内源的蛋白激酶活性转导胞外信号。

RPKs有两种类型如下:

酪氨酸蛋白激酶类:以酪氨酸为靶氨基酸;

丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶类:以丝或(和)苏氨酸为靶氨基酸;

kinomics激酶组学植物中还没有证实动物细胞RPKs同源的植物基因产物具有受体功能,也未发现这类蛋白的天然配基,故称这类蛋白为类受体蛋白激酶(receptor-likeproteinkinase,RLKs)。RLKs的种类和结构RKLs的结构STEP3STEP2STEP1

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