活性污泥中微生物分离及生长量检测省公开课一等奖全国示范课微课金奖课件.pptx

活性污泥中微生物

分离及生长量检测

试验性质：综合

试验类别：本科基础试验

试验课时：4

试验教师：

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一、试验目标

（1）经过对活性污泥中微生物（主要是细菌）生长量检测试验，对微生物菌落形态特征、细菌生长曲线特点及测定原理有所了解。

（2）够熟练使用分光光度计，掌握培养基制备及无菌操作方法、微生物纯种分离，学会用比浊法测定细菌生长曲线。

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二、仪器与材料

试验仪器：高压灭菌锅721分光光度计比色杯恒温摇床

试验材料：活性污泥肉膏蛋白胨培养基（固体和液体）无菌水

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三、试验原理

采取涂布法将菌液（活性污泥）分散在平板培养基表面，经培养后取得单菌落。

因为细菌菌悬液浓度与光密度（OD值）成正比，本试验采取比浊法，利用分光光度计测定菌悬液光密度来推知菌液浓度，并将所测OD值与其对应培养时间作图，即可绘出该菌在一定条件下生长曲线，从而了解各菌生长规律。

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四、试验内容

（1）细菌培养基（固体和液体）制备及灭菌；

（2）细菌纯种分离；

（3）细菌菌落形态观察；

（4）分光光度计使用及细菌生长（比浊法）测定。

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五、试验步骤

LB培养基（固体和液体）制备及灭菌。

活性污泥中微生物分离

活性污泥梯度稀释

制作平板

灭菌

分装

包扎

称量药品

调pH

溶化

细菌菌落形态观察

37℃恒温培养24小时

涂平板

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五、试验步骤

活性污泥生长量检测

接入

10mL活性污泥

绘制生长曲线

每隔2h测定培养液OD值

37℃振荡培养

100mL液体培养基

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