槐花米中芦丁的鉴定.pptVIP

上次实验报告的修订45图1聚酰胺色谱柱层析后的收集液的聚酰胺薄膜层析分析图说明：图1中的1表示收集液1；2表示收集液2；3表示收集液3；4表示芦丁标准品；5表示槲皮素标准品。1234504030102结论：因为Rfa=Rfd，说明收集液1是芦丁。因为Rfb1=Rfd；Rfb2=Rfe，说明收集液2是芦丁和槲皮素的混合物。因为Rfc=Rfe；说明收集液3是槲皮素。所以，用聚酰胺柱层析的方法分离芦丁和槲皮素，用50%的乙醇，90%的乙醇梯度洗脱时，先从柱子流出的是芦丁，其次是槲皮素。上次实验报告的修订实验五槐花米中芦丁的鉴定01掌握硅胶薄层层析鉴定鼠李糖和葡萄糖的方法。02掌握芦丁和槲皮素的化学检识方法。一、实验目的根据鼠李糖和葡萄糖在硅胶板上的分配系数不同达到分离的目的。根据芦丁和槲皮素的理化性质来检识芦丁和槲皮素。0102二．实验原理糖液的硅胶薄层层析硅胶板的活化；配制展开剂，正丁醇：醋酸：水＝1：5将展开剂倒入层析缸中，展开缸中展开剂的高度4mm左右。画基线，基线距底边1.0～1.5cm；三．实验操作点样（点样顺序为：糖液、鼠李糖、葡萄糖），点样一般为圆点，点样直径一般不大于2mm，点样时必须注意勿伤薄层表面。将硅胶板放入展开缸的展开剂中，浸入展开剂的深度为距圆点5mm为宜，一般展距为8cm，取出薄层板，晾干。（一）糖液的硅胶薄层层析喷苯胺－邻苯二甲酸试剂，在105℃下烘10min。实验结果见图1。（一）糖液的硅胶薄层层析（二）芦丁、槲皮素及糖的化学检识浓硫酸和浓盐酸反应取芦丁或槲皮素数毫克于比色瓷板上，分别加浓硫酸或浓盐酸1滴，注意呈色变化，研磨后溶解成橙色溶液，加较多量的水稀释后转为浅黄色，析出黄色沉淀。2.酸性试验：取小试管8支，每4支一组，第一组每管中加入芦丁1mg，第二组每管中加入槲皮素1mg，每组试管中分别加入稀氨水、5%碳酸氢钠、5%碳酸钠水溶液、1%氢氧化钠水溶液各2ml，振摇后观察各管溶解情况。溶解的溶液应呈黄色。再加浓盐酸滴酸化，黄色褪去或变浅，并有沉淀析出或产生混浊。3.莫氏（molish）反应取试样1mg置小试管中，加乙醇1ml溶解，加α-萘酚1-2滴，摇匀，倾斜试管，沿管壁徐徐注入浓H2SO4约1ml，静置。观察两层溶液的界面变化，出现紫色环者为阳性，表示样品分子中含有糖的结构（糖和苷类均呈阳性反应）。比较芸香苷和槲皮素的不同。镁粉—盐酸试验：A取芦丁1mg，加乙醇2ml在水浴上加热溶解，加入少许镁粉，滴加数滴浓HCl，溶液由黄色渐变红色者表示有黄酮类化合物。以同法试验槲皮素。B三氯化铝反应：C取样品1mg溶于1ml乙醇中，加1%三氯化铁乙醇液2-3滴，黄酮类呈鲜黄色。D