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生物芯片技术;了解生物芯片功效,及其医学研究领域中作用,以及生物芯片技术最新进展。
熟悉生物芯片种类及其作用,基因芯片、蛋白芯片和微缩芯片试验室原理及其制备方法。
掌握基因芯片工作原理、制备方法及其在临床诊疗中意义。;第一节生物芯片概述;一、生物芯片定义;生物芯片技术是经过缩微技术,依据分子间特异性地相互作用原理,将生命科学领域中不连续分析过程集成于硅芯片或玻璃芯片表面微型生物化学分析系统,以实现对细胞、蛋白质、基因及其它生物组分准确、快速、大信息量检测。按照芯片上固化生物材料不一样,能够将生物芯片划分为基因芯片、蛋白质芯片、细胞芯片和组织芯片。;二、生物芯片特点;生物芯片分类;三、生物芯片在医学中应用;基因芯片;基因芯片(genechip)又称DNA芯片(DNAchip)或DNA微阵列(DNAmicro-array)。基因是载有生物体遗传信息基本单位,存在于细胞染色体上。将大量基因片段有序地、高密度地排列在玻璃片或纤维膜等载体上,称之为基因芯片。;基因芯片发展历史;一、基因芯片原理;基因芯片研制总体蓝图;图11-1基因芯片技术主要步骤;二、基因芯片技术;2.探针在载体表面固定
固相载体
固体片状:主要有玻片、硅片和瓷片等;
薄膜状:有硝酸纤维素膜、尼龙膜以及聚丙烯膜等。;探针在载体表面固定可分为两大类方法:
合成后点样,多用于大片段DNA,有时也用于寡核苷酸,甚至mRNA。
原位合成(即在支持物表面原位合成寡核苷酸探针),适合用于寡核苷酸。;(二)样品制备;(三)杂交反应;(四)信号检测和分析;基因芯片杂交结果要用专用扫描系统读取。;基因芯片扫描结果;GENERALSCANNING-ScanArraySystem
;三、基因芯片应用;表示谱芯片实例;(五)在疾病诊疗应用
(1)感染性疾病诊疗
性传输疾病、肝炎等。
(2)遗传性疾病诊疗
地中海贫血、婚前检验等。
(3)耐药性检测
结核分支杆菌耐药性检测芯片等。;生物芯片优、缺点;生物芯片于普通分子杂交比较;存在问题;基因芯片技术本身有一些关键问题亟待处理:
(1)基因芯片特异性提升
(2)样品制备和标识操作简化
(3)增加信号检测灵敏度
(4)???度集成化样品制备、基因扩增、核酸标识
及检测仪器研制和开发。
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