植物磷素营养代谢分子.pptVIP

菌根促进磷的吸收和改善磷营养，是菌根植物生长与产量得以增加的主要原因。以单位根长计算，菌根比非菌根可以多吸收几倍的磷。因为菌丝的生长增加了吸收表面积，菌丝可达到距根表面数厘米的地方，使根的吸磷范围超过根际磷耗竭区。已经有报道表明，VA菌根的菌丝将磷从土壤运输到寄主根细胞距离可长达8cm。菌根对磷营养的主要作用是加快对难溶磷的吸收速率。菌丝呼吸释放大量的CO2，溶解后成为碳酸，促进土壤难溶磷化合物（如磷酸钙）溶解。真菌膜转运系统对磷的亲和力比寄主根系的高，使真菌菌根有较高的磷吸收效率。由于菌丝以较高的速率吸收土壤中的磷，促进邻近的土壤和肥料中一些难溶性无机磷化合物的溶解作用，红辣椒地上部干重明显增加。而与红辣椒相反，向日葵利用难溶性磷的能力很强，因此尽管其菌根的发育较好，而且磷的吸收也显著增加，但是VA菌根的侵染并未明显表现出促进生长的效应。表明菌根依存性的基因型差异可归结于各种因素。菌根从土壤中吸收磷并转运到植物体的分子生物学Harrison等1995年首次分离到了一种孢囊丛枝状真菌Glomusversiforme的细胞跨膜磷酸盐载体基因(gvpt)，并对其载体结构及吸收磷酸盐的分子机制进行了研究。其方法是：制备豆科植物苜蓿（Medicagotruncatula）与真菌G.versiforme的共生菌根cDNA文库，以酵母(Saccharomycescerevisidae)的pho84基因为探针，从该基因文库中分离到一个cDNA克隆(gvpt)，全长1932bp，在阅读框(ORF)的5’末端和3’末端不转录序列分别为112bp和257bp长。编码蛋白521个氨基酸，是一个膜蛋白(integralmembraneprotein)，包含有12个跨膜结构域(membranespanningdomain)，与所有真核生物（eukaryote）和原核(prokaryote)膜转运体有相似的二级结构(secondarystructure)。GVPT的氨基酸序列与Pho84有47.9%的同源性，与Pho5有45%的同源性它们之间最保守的序列区包括有激酶C(kinaseC)和酪蛋白激酶II(caseinkinaseII)的磷酸化位点(phosphorylationsite)。gvpt是从有两个基因组（植物和真菌）的cDNA文库中鉴定出来的，因此，可能来自于共生体的任何一个基因组。用M.truncatula基因组DNA进行Southern印迹分析发现，gvpt不是寄主植物的基因。由于G.versiforme是寄生的，纯真菌材料难以得到，因此用gvpt的特异序列设计引物，对G.versiforme的基因组DNA进行PCR扩增。扩增片断进行序列分析，发现与?gvpt相同，同时PCR扩增共生菌根(M.truncatula,G.versiforme)DNA，得到同样的DNA片段，而从没有菌丝的M.truncatula根系没有扩增到这样的片段。由此，证明gvpt是真菌上的基因。pho84缺失突变体缺乏高亲和磷酸盐转运体，不能在低浓度的磷条件下吸收磷酸盐甚至在高浓度磷酸盐时可产生抑制性酸性磷酸酶，而且这种现象很容易检测到。因为pho84突变体NS219细胞容易染红，而野生型仍是白色，可在介质中生长。将gvptcDNA连接到一个酵母表达载体pAAH5上转移到pho84突变的酵母NS219株系上，gvpt在NS219细胞中表达，使NS219显示出野生型的酸性磷酸酶活性，表现形式仍然是白色的，表明gvpt的表达互补了pho84缺失突变体的表现型，表达载体没有gvpt序列的NS219转化体，显示pho84缺失突变体的表现型，染色为暗红色。这一试验充分证明，gvpt是一个编码功能性磷酸盐载体的基因。孢囊丛枝状真菌G.margarita菌丝的磷酸盐吸收也有两个吸收系统：主动的高亲和力系统被动的低亲和力系统原位杂交试验证明：gvpt不是在根内的真菌菌丝中表达，而是在分枝于根外部的菌丝中表达。收集菌根完整的外部菌丝，gvpt转录物进行反转录分析（reversetranscription,RT-PCR)，含有内部菌丝的根组织gvpt转录非常低，gvpt转录物主要存在于根的外部菌丝中，其中的gvpt转录物高出内部30倍。表明外部菌丝是基因表达的主要部位。高磷吸收和低磷吸收系统的区别高磷吸收低磷吸收条件外界低磷外界高磷能量需要能量不需要磷流动的方向逆向正向作用方式主动被动一、吸收磷的特点途径生长介质中的磷通过根毛和表皮细胞进入皮层，再由内皮层通道细胞进入中柱，沿中柱木质部运送至地上部，从而分配到地上部不同的器官。吸收运转的控制点磷通过细胞质膜进