中药化学实用技术黄连中小檗碱的提取精制检识课件.ppt

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—黄连中小檗碱的提取精制检识黄连中小檗碱的提取精制检识实验仪器及试剂【仪器】500ml烧杯、玻璃棒、蒸馏水瓶、电热套、pH试纸、铁架台、12cm漏斗、布氏漏斗、抽滤瓶、循环水式真空泵、250ml圆底烧瓶、球型冷凝管、烧瓶夹、蒸馏弯管、直型冷凝管、接液管、50ml锥型瓶、万用夹、量筒、分液漏斗、研钵、试管等【试剂】3%硫酸、石灰乳、浓盐酸、稀硫酸、展开剂（乙醇：丙酮：乙酸=4：5：1）、浓硝酸、漂白粉、氢氧化钠试液、碘化铋钾试液、碘化汞钾试液、硅钨酸试液黄连中小檗碱的提取精制检识一、黄连中小檗碱的提取（2学时）实验目的：（1）掌握自黄连中提取小檗碱的原理和方法（2）掌握盐析的原理黄连中小檗碱的提取精制检识实验原理小檗碱的提取是利用小檗碱盐的溶解性，通过加0.3%硫酸溶液加热使小檗碱成硫酸盐溶于水，再加石灰乳使小檗碱游离兼去除杂质，过滤后用浓盐酸调pH值使小檗碱成盐酸盐，溶解度降低，同时加氯化钠盐析（促进盐酸小檗碱快速结晶析出），得盐酸小檗碱。黄连中小檗碱的提取精制检识实训步骤及操作黄连中小檗碱的提取精制检识二、盐酸小檗碱的精制（2学时）实训目的（1）掌握重结晶精制盐酸小檗碱的原理和操作方法（2）练习硅胶薄层色谱板的制备黄连中小檗碱的提取精制检识实训原理盐酸小檗碱在冷热水中的溶解度差异较大，冷水（1：500）溶解度小,热水（1：20-30）溶解度大，将盐酸小檗碱加热制成热饱和溶液过滤去除水不溶性杂质后放冷，可析出较纯结晶,而水溶性杂质可通过抽滤留在溶液里。黄连中小檗碱的提取精制检识三)实训步骤及操作（1）精制黄连中小檗碱的提取精制检识2）铺板(每人一片）2片量一齐研磨分装称取9g硅胶G，加约23-24ml0.3%CMC-Na，在研钵中同一方向研匀，倾倒在两块玻璃板上，轻轻晃动，使硅胶均匀铺在玻璃板上，形成光滑平整的表面，自然干燥。用时在105℃烘30min。黄连中小檗碱的提取精制检识盐酸小檗碱的分离和检识（4学时）实训目的（1）掌握柱色谱分离的原理和方法（2）掌握硅胶薄层色谱检识生物碱盐成分的原理和方法（3）掌握生物碱类成分的化学检识方法黄连中小檗碱的提取精制检识实训原理柱层析法的分离原理是根据物质在硅胶或氧化铝上的吸附力不同而使各组分分离。一般情况下极性较大的物质易被吸附，极性较弱的物质不易被吸附。当采用溶剂洗脱时，发生一系列吸附→解吸→再吸附→再解吸的过程，吸附力较强的组分，移动的距离小，后出柱；吸附力较弱的组分，移动的距离大，先出柱。氧化铝是一种吸附性较强的极性吸附剂。色谱用的氧化铝有碱性、中性和酸性之分，其中以中性氧化铝使用最多。由于氧化铝微显碱性，故主要适用于碱性或中性亲脂性成分的分离，如生物碱、萜类等。氧化铝的吸附力也与含水量有直接关系，可根据含水量不同用不同活性级别来表示。黄连中小檗碱的提取精制检识实训原理硅胶薄层色谱分离黄酮类成分的原理为极性吸附，同一种成分在同一硅胶薄层板相同位置显相同颜色的斑点。小檗碱在碱性条件下与氯仿、丙酮、苯均能形成加成物；生物碱在酸性条件下与沉淀试剂生成弱酸不溶性盐或络合物沉淀；小檗碱与某些试剂反应生成特殊颜色，叫显色反应，可能与氧化、脱水、缩合反应有关。黄连中小檗碱的提取精制检识实训步骤及操作精制的盐酸小檗碱溶液抽滤，抽干，用少许蒸馏水洗涤，烘干，得小檗碱精品。称重，计算提取率。柱层析分离及薄层层析检测吸附剂：中性氧化铝（100-200目）层析柱：2*30cm玻璃柱洗脱剂：乙醇（1）排气：玻璃柱底部垫棉花，加少量乙醇（5ml）排气（2）湿法上柱:20g氧化铝+20ml乙醇（3）上样：20-25mg盐酸小檗碱加1ml无水乙醇溶解制成溶液（4）洗脱：乙醇洗脱，收集黄色带，棕色带课不收集（5）点样、展开、显色：点收集液和对照品溶液两个点硅胶薄层色谱点样：取硅胶薄层板，在下端约1.5处作为起始线，点下列样品：①柱色谱分离后盐酸小檗碱乙醇液②盐酸小檗碱对照品溶液③精制后盐酸小檗碱乙醇液展开：甲醇：丙酮：乙酸（4：5：1）约10ml，上行展开展距：约10cm显色：展开完毕，将硅胶薄层板取出，记录展开剂前沿位置。待溶剂挥尽后，先在可见光、紫外光下观察，记录斑点颜色和位置。结果：计算Rf值，并比较。黄连中小檗碱的提取精制检识化学检识（1）丙酮小檗碱试验：取盐酸小檗碱少许，加入5ml蒸馏水，水浴加热溶解，溶解后加入氢氧化钠试液2滴，显橙色，放冷；加入丙酮4滴，出现黄色丙酮小檗碱结晶。（2）浓硝