色谱分析概论.ppt

6.调整保留体积VR?某组分的保留体积扣除死体积后，称为该组分的调整保留体积。VR?=VR?V0=tR?Fco第30页，共62页，星期日，2025年，2月5日7.相对保留值r2,1某组分2的调整保留值与组分1的调整保留值之比，称为相对保留值。r2,1=tR2?/tR1′=VR2?/VR1?由于相对保留值只与柱温及固定相性质有关，而与柱径、柱长、填充情况及流动相流速无关，因此，它在色谱法中，特别是在气相色谱法中，广泛用作定性的依据。第31页，共62页，星期日，2025年，2月5日在定性分析中，通常固定一个色谱峰作为标准（s），然后再求其它峰（i）对这个峰的相对保留值，此时可用符号?表示，即?=tR?(i)/tR?(s)式中tR?(i)为后出峰的调整保留时间，所以?总是大于1的。相对保留值往往可作为衡量固定相选择性的指标，又称选择因子。第32页，共62页，星期日，2025年，2月5日(五)区域宽度色谱峰的区域宽度是色谱流出曲线的重要参数之一，用于衡量柱效率及反映色谱操作条件的动力学因素。表示色谱峰区域宽度通常有三种方法。第33页，共62页，星期日，2025年，2月5日1.标准偏差?---即0.607倍峰高处色谱峰宽的一半。2.半峰宽Y1/2---即峰高一半处对应的峰宽。它与标准偏差的关系为Y1/2=2.354?3.峰底宽度Y---即色谱峰两侧拐点上的切线在基线上截距间的距离。它与标准偏差?的关系是Y=4?第34页，共62页，星期日，2025年，2月5日第35页，共62页，星期日，2025年，2月5日从色谱流出曲线中，可得许多重要信息：(i)根据色谱峰的个数，可以判断样品中所含组分的最少个数；(ii)根据色谱峰的保留值，可以进行定性分析；(iii)根据色谱峰的面积或峰高，可以进行定量分析；(iv)色谱峰的保留值及其区域宽度，是评价色谱柱分离效能的依据；(v)色谱峰两峰间的距离，是评价固定相（或流动相）选择是否合适的依据。第36页，共62页，星期日，2025年，2月5日色谱分析的目的是将样品中各组分彼此分离，组分要达到完全分离，两峰间的距离必须足够远，两峰间的距离是由组分在两相间的分配系数决定的，即与色谱过程的热力学性质有关。但是两峰间虽有一定距离，如果每个峰都很宽，以致彼此重叠，还是不能分开。这些峰的宽或窄是由组分在色谱柱中传质和扩散行为决定的，即与色谱过程的动力学性质有关。因此，要从热力学和动力学两方面来研究色谱行为。第37页，共62页，星期日，2025年，2月5日关于保留值死时间(tM):无保留组分出峰时间保留时间(tR):调整保留时间(t’R):死体积(VM):保留体积(VR):调整保留体积(V’R):第38页，共62页，星期日，2025年，2月5日1.5色谱现代发展及相关联用技术1.理论方面色谱理论的本质是研究色谱热力学、色谱动力学以及热力学与动力学有机结合来寻求色谱分离的最佳化途径。平衡理论、塔板理论、纵向扩散理论、速率理论；块状液膜模型、分子顶替模型、各种保留值预测理论，等等。第39页，共62页，星期日，2025年，2月5日2.新型固定相和检测器的研究（1）固定相手性固定相—手性化合物的分离分析固定相载体的研究：粒径均匀、高强度的高分子多孔微球制备技术一般仪器所用填料3~5?m；超高液相色谱仪中所用填料1.7?m；整体柱技术（棒柱）：将填料单体、引发剂、制孔剂混合后通过原位聚合或固化在柱管中形成的多孔结构的棒状整体式柱体。目的：提高柱效和重现性，实现快速分离分析。第40页，共62页，星期日，2025年，2月5日（2）检测器紫外检测器；荧光检测器；电化学检测器；示差折光检测器等。蒸发光散射检测器——可用于不吸收紫外光的物质（糖类等）的检测；适合于测挥发性低于流动相得物质。半导体荧光检测器——具有高灵敏度，检测限可优于紫外分光光度法2个数量级。第41页，共62页，星期日，2025年，2月5日2.技术方面1）超临界流体色谱（SFC）超临界流体：物质处于临界温度和临界压力以上，既不是液体，又不是气体，是一种单一