DB22T 396.6-2017 保健用品毒理学评价程序与检验方法 第6部分：细菌回复突变试验　　.docxVIP

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备案号：58325-2018DB22吉林省地方标准

DB22/T396.6—2017代替DB22/T396-2014

保健用品毒理学评价程序与检验方法第6部分：细菌回复突变试验

ToxicologicalevaluationproceduresandtestmethodsforhealthcareproductsPart6:Amestest

2017-11-10发布2017-12-30实施

吉林省质量技术监督局发布

I

DB22/T396.6—2017

前言

DB22/T396《保健用品毒理学评价程序与检验方法》拟分为如下部分：——第1部分：评价程序；

——第2部分：急性经皮毒性试验；——第3部分：长期经皮毒性试验；——第4部分：皮肤刺激性试验；

——第5部分：皮肤变态反应试验；——第6部分：细菌回复突变试验；——第7部分：啮齿动物微核试验；——第8部分：小鼠精子畸形试验；

——第9部分：哺乳动物培养细胞染色体畸变试验；——第10部分：致畸试验；

——第11部分：致癌试验；

——第12部分：人体皮肤斑贴试验。本部分为DB22/T396-2017的第6部分。

本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本部分代替DB22/T396-2014《保健用品毒理学评价程序与检验方法》，与DB22/T396-2014相比，结构做了较大调整。除编辑性修改外，主要技术变化如下：

——增加了警示——增加了范围；——增加了仪器；

——增加了培养基与试剂；——修改了试验测试；

——修改了数据处理和评价结果。

本部分由吉林省卫生与计划生育委员会提出并归口。本部分起草单位：吉林省疾病预防控制中心。

本部分主要起草人：张晶莹、宋昕恬、孟令仪、吴晓刚、孙兰、隋自洁、高峰。本部分所代替标准的历次版本发布情况为：

——DB22/T396-2004；——DB22/T396-2014。

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DB22/T396.6—2017

保健用品毒理学评价程序与检验方法第6部分：细菌回复突变试验

警示——使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验。本标准并未指出所有可能的安全问题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规规定的条件。

1范围

本标准规定了保健用品毒理学细菌回复突变试验评价程序。本标准适用于保健用品毒理学细菌回复突变试验检验方法。

2鼠伤寒沙门氏菌/回复突变试验（Ames试验）

2.1菌株

常用组氨酸缺陷型鼠伤寒沙门氏菌(Samomllatyphimurium)TA98、TA100、TA97和TA102，经检定符合要求，-80℃或液氮冻存备用。

2.2仪器和设备

2.2.1培养箱。

2.2.2恒温水浴。

2.2.3压力蒸汽消毒器。

2.2.4干烤箱。

2.2.5低温冰箱(-80℃)或液态生物容器、普通冰箱。2.2.6天平(精确度0.1g或0.0001g)。

2.2.7菌落计数仪。

2.2.8低温高速离心机。

2.2.9玻璃器皿等。

2.3培养基与试剂

2.3.1营养肉汤培养基

牛肉膏

5.0g

胰胨（或混合蛋白胨）

5.0g

氯化钠

2.5g

磷酸氢二钾（K2HPO4?3H2O）

1.3g

蒸馏水

500ml

加热溶解，调节pH至7.4，分装后0.103MPa20min灭菌，普通冰箱保存备用，保存期不超过半年。

2.3.2营养肉汤琼脂培养基

2

DB22/T396.6—2017

用作a.基因型鉴定的结晶紫敏感试验，抗氨苄青霉素和四环素试验，紫外线敏感性试验。b.细菌活

力鉴定。

琼脂粉

1.5g

营养肉汤培养基

100ml

加热融化后调pH至7.4，0.103MPa20min灭菌。

2.3.3底层培养基所需试剂及配置方法

2.3.3.1磷酸盐储备液

磷酸氢钠铵（NaNH4HPO4?4H2O）

17.5g

柠檬酸（C6H8O7?H2O）

10.0g

磷酸氢二钾(K2HPO4)

50.0g

硫酸镁(MgSO4?7H2O)

1.0g

加蒸馏水至100ml，0.103MPa20min灭菌。

注：待其他试剂完全溶解后再将硫酸镁缓慢放入其中继续溶解，否则易析出沉淀。

2.3.3.240%葡萄糖溶液

葡萄糖