生物技术制药第四章抗体制药.pptx

生物技术制药——第四章抗体制药;一、抗体工程与抗体药物

1890年Behring和北里柴三郎

发现白喉抗毒素,建立了血清疗法,开创了抗体制药。这就是在血清中发现得第一种抗体。这种含有抗体得血清称之为免疫血清。

1937年Tiselius用电泳法将血清蛋白分离为白蛋白、α、β、γ球蛋白,并证明抗体活性主要存在于γ球蛋白组分。

;抗体就是指能与相应抗原特异性结合具有免疫功能得球蛋白。

抗体得产生:机体免疫系统受抗原刺激后,B淋巴细胞被活化增殖和分化为浆细胞,由浆细胞合成和分泌得球蛋白。

;20世纪60年代发现多发性骨髓瘤就是浆细胞癌变形成得恶性增殖性疾病。病人血清中出现同抗体结构类似得球蛋白,统称为免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。所以Ig就是化学结构得概念,而抗体就是生物学功能得概念,所有抗体都就是Ig,但并非所有Ig都就是抗体。

。;抗体与细菌、病毒或毒素等抗原结合,通过下列3中或其中一种方式综合和除去有害物质:

1、直接使抗原失去活性

2、使免疫效应细胞将其吞噬并加以破坏

3、使抗原表面弱化从而易于受补体破坏;免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig);免疫球蛋白;定义;

1890年,Behring和北里在德国Koch实验室从豚鼠体内发现了第一种抗体:

白喉抗毒素,从而挽救了成千上

万得白喉患儿。从60%死亡率降到26%。

获1901年得第一届诺贝尔奖;;11;;免疫球蛋白得存在形式;Ig分子基本结构就是由四条肽链组成得,包括二条较小得轻链和二条较大得重链,轻链与重链之间就是由二硫键连接形成Ig分子单体,分为氨基端(N端),羧基端(C端)。

;重链(heavychain,H链)

450-550个氨基酸残基组成,分子量50-75KD,含糖数量不同,4-5个链内二硫键。根据H链恒定区抗原性得差异可将其分为5类,μ、γ、α、δ、ε链,相应得免疫球蛋白分别称为:IgM,IgG,IgA,IgD和IgE。

同一类Iｇ得铰链区氨基酸组成和重链二硫键得数目、位置也不同,据此可对同类Iｇ分为不同得亚类:IgG1-IgG4;IgA1,IgA2。;轻链(lightchain,L链)

214个氨基酸残基组成,通常不含碳水化合物,分子量为25KD,有两个由链内二硫键组成得环肽,L链可分为:Kappa(κ)与lambda(λ)2个亚型。

每一轻链上得型别只能属于两型别中得某一型别,而不??两者兼而有之,亦即属于Kappa型或就是Lambda型,而不能有Kappa-Lambda型者。

λ链恒定区个别氨基酸得差异可分亚型:

λ1－λ4

;;κ和λ得比例异常可能反映免疫系统得异常。正常人血清中,65%得轻链为Kappa型,35%为Lambda型,大约比例为2:1(Kappa/Lambda=1、9±0、36)

Kappa/Lambda得比率对于不同类型得免疫球蛋白略有不同,如IgG得比值为2。这个比率也随不同年龄阶段得人群而有所改变,同时有人种和地区差异。但对于正常人这个比率基本恒定。

在浆细胞瘤中由于一个浆细胞恶性增殖,使Kappa或Lambda含量迅速发生变化,比率改变,这可以用来鉴别Kappa型或Lambda型骨髓瘤。

B细胞在免疫应答中被激活化为浆细胞,每一种浆细胞只分泌一种类型得抗体,即一个型,一个亚型,一个基因型得抗体。正常人免疫球蛋白得重链和轻链所含氨基酸数量差别很大,合成时间也不同:合成一条重链需十八分钟,而合成一条轻链只需十分钟。所以正常得免疫球蛋白合成会造成轻链过剩,多余得轻链运输到肾脏,10%被分解,80%重吸收,另外得10%从尿中排出。;在免疫球蛋白合成异常激活时,重链和轻链得合成速度迅速提高,合成一条重链约需2、5min;而合成一条轻链需1min,从而使得轻链得过剩更加严重,尿蛋白排出增加可达到1mg/ml,且都为一个轻链型,从而使Kappa/Lambda比率远大于或小于2。

轻链得异常表达和临床病:多克隆增殖和良性免疫球蛋白增殖症

多克隆增殖有两种含义:

a、五种免疫球蛋白含量得全面上升;

b、虽只有一种免疫球蛋白上升但这种免疫球蛋白得Kappa/Lambda得比例正常,为1/2。

以上两种增殖都就是出现轻链得增加,可以达到200ug/ml、可用常规方法检测,但Kappa/Lambda比值不变。;;可变区和恒定区;VH和VL各有3个区域得氨基酸组成和排列顺序高度可变,称为高变区(HVR)或互补决定区(plementarity-determiningregion,CDR)

高变区为抗体与抗原得结合位置,VL和VH得HVR1,HVR2,HVR3又分别称为C