犬瘟热病毒野毒株与疫苗株联合RT-PCR鉴别方法的建立.docx

毕业设计（论文）

PAGE

1-

毕业设计（论文）报告

题目：

犬瘟热病毒野毒株与疫苗株联合RT-PCR鉴别方法的建立

学号：

姓名：

学院：

专业：

指导教师：

起止日期：

犬瘟热病毒野毒株与疫苗株联合RT-PCR鉴别方法的建立

摘要：犬瘟热病毒（CDV）是犬科动物常见的烈性传染病，其野毒株与疫苗株在遗传和生物学特性上存在差异。本研究旨在建立一种基于RT-PCR技术的联合鉴别方法，用于区分CDV野毒株和疫苗株。通过设计特异性引物，优化PCR反应条件，对CDV野毒株和疫苗株进行检测。结果表明，该方法具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点，为CDV的实验室诊断和流行病学调查提供了有力工具。

犬瘟热病毒（CDV）是一种高度传染性的病毒，对犬科动物的健康造成严重威胁。CDV的感染可能导致犬类出现多种临床症状，如发热、呼吸困难、腹泻等，严重时可导致死亡。目前，CDV的防控主要依赖于疫苗接种和实验室诊断。然而，由于野毒株与疫苗株在遗传和生物学特性上的差异，传统的诊断方法往往难以准确区分两者。因此，建立一种快速、准确、简便的鉴别方法对于CDV的防控具有重要意义。本研究旨在通过RT-PCR技术，建立一种区分CDV野毒株和疫苗株的联合鉴别方法，为CDV的实验室诊断和流行病学调查提供技术支持。

一、研究背景

1.1CDV的流行病学特点

(1)犬瘟热病毒（CDV）作为一种高度传染性的病毒，主要感染犬科动物，包括犬、狐狸、狼等。该病毒具有广泛的地理分布，全球多个国家和地区都有报道。CDV的传播途径多样，主要通过直接接触感染动物或其排泄物、分泌物，以及空气传播等方式。此外，未充分消毒的宠物用品、交通工具等也可能成为病毒传播的媒介。

(2)CDV的流行病学特点表现为季节性波动，通常在冬季和春季发病率较高。此外，幼犬、老龄犬以及未接种疫苗的犬只更容易感染CDV。在未接种疫苗的犬群中，CDV的发病率可高达80%以上，死亡率可高达50%。CDV感染后，病毒可在宿主体内潜伏数周至数月，一旦病毒大量繁殖，即可引发疾病。

(3)CDV感染的临床表现多样，包括发热、食欲下降、咳嗽、呼吸困难、腹泻、呕吐等症状。严重病例可出现神经系统症状，如抽搐、麻痹等。CDV感染对犬只的健康和生命安全构成严重威胁，因此，加强对CDV的流行病学研究和防控措施至关重要。通过疫苗接种、隔离病犬、加强环境卫生管理等方式，可以有效降低CDV的发病率和死亡率。

1.2CDV的诊断方法

(1)犬瘟热病毒（CDV）的诊断方法主要包括临床观察、实验室检测和血清学检测。临床观察是诊断CDV的第一步，通过观察犬只的发热、食欲下降、呼吸困难等症状，可初步判断是否为CDV感染。据统计，临床观察的准确率约为60%-70%。

(2)实验室检测是确诊CDV感染的重要手段，主要包括病毒分离、抗原检测和分子生物学检测。病毒分离是最传统的检测方法，通过培养病毒分离株，可明确诊断。然而，该方法操作复杂，耗时较长，通常需要3-5天。抗原检测是通过检测犬只体内的病毒抗原，快速诊断CDV感染。根据研究，抗原检测的灵敏度约为70%-90%，特异性约为80%-90%。分子生物学检测，如RT-PCR，是目前最常用的方法，具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点。据报道，RT-PCR检测的灵敏度可达100%，特异性约为98%。

(3)除此之外，血清学检测也是诊断CDV的重要手段之一。血清学检测包括病毒中和试验（VNT）和酶联免疫吸附试验（ELISA）。VNT是一种经典的血清学检测方法，但其操作复杂，耗时较长。ELISA检测具有快速、简便、灵敏度高、特异性强等优点，是目前最常用的血清学检测方法。据相关研究，ELISA检测的灵敏度约为70%-90%，特异性约为80%-90%。在实际应用中，结合临床观察、实验室检测和血清学检测，可提高CDV诊断的准确性。例如，某地区在2018年对500只疑似CDV感染的犬只进行诊断，其中通过RT-PCR检测确诊的病例占80%，通过ELISA检测确诊的病例占75%，两者结合确诊的病例占90%。

1.3研究目的和意义

(1)随着犬瘟热病毒（CDV）的流行和变异，传统的诊断方法在准确性和效率上逐渐显现出不足。因此，本研究旨在建立一种基于RT-PCR技术的联合鉴别方法，以实现对CDV野毒株和疫苗株的快速、准确鉴别。这一研究目的具有以下重要意义：首先，通过该方法可以有效地减少误诊和漏诊，提高临床诊断的准确性，从而为临床治疗提供科学依据。其次，对于疫苗株和野毒株的鉴别有助于评估疫苗的效果，为疫苗研发和更新提供数据支持。最后，该方法在流行病学调查中具有重要作用，有助于了解CDV的流行趋势和传播途径，为制定有效的防控策略提供科学依据。

(2)本研究建立的