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膜蛋白相互作用的原位分析技术

目录

膜蛋白相互作用的原位分析技术概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.1膜蛋白相互作用的重要性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.2原位分析技术的背景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.3技术发展历程．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

原位分析技术原理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

2.1膜蛋白结构特点．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

2.2相互作用识别机制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

2.3分析技术分类．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

常见原位分析技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

3.1表面等离子共振技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

3.1.1SPR技术原理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

3.1.2SPR技术在膜蛋白研究中的应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

3.2荧光共振能量转移技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

3.2.1FRET技术原理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

3.2.2FRET在膜蛋白研究中的应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

3.3质谱技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

3.3.1质谱技术原理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

3.3.2质谱在膜蛋白研究中的应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

3.4荧光显微镜技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

3.4.1荧光显微镜技术原理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

3.4.2荧光显微镜在膜蛋白研究中的应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

膜蛋白相互作用原位分析技术操作步骤．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

4.1样品准备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

4.2仪器设备准备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

4.3实验操作流程．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

4.3.1样品加载．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

4.3.2数据采集．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

4.3.3数据分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

技术评价与优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

5.1技术评价标准．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

5.2技术优化策略．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

5.2.1样品处理优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

5.2.2仪器参数优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

5.2.3数据分析方法优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

应用案例．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32

6.1膜蛋白相互作用研究案例．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

6.1.1案例一．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

6.1.2案例二．．．．．．．．．．．．．．．．．