手部微生物监测标准操作规程.docVIP

手部微生物监测标准操作规程（SOP）

一、适用范围

1．评价医务人员洗手、卫生手消毒、外科手消毒的效果。

2．怀疑医院感染暴发或流行与手的传播有关时。

二、监测时机

在接触患者前或进行诊疗活动前采样。

三、采集方法

i．被检人洗手或手消毒后，在接触患者前或进行诊疗活动前采样。

2．被检人将双手伸出，五指并拢。

3。检查者取2支无菌棉拭子，并浸于含相应中和剂的无菌洗脱液中。

4．取_支棉拭子在一只手手指曲面，从指根到指端往返涂擦2次(一只手涂擦面积约30cm2)，

并随之转动采样棉拭予；按同样方法用另一支棉拭予涂擦另一只手。

5．剪去操作者手接触部位，将2支棉拭子投入10ral含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立

即送检。

四、标本检测

(一)带菌量检测(平皿倾注法)

1．将采样管在混匀器上震荡20s或用力振打80次左右。

2．将无菌吸管分别吸取lmJ待检样品接种于2个直径为90mm无菌平皿中。

3．再加入已熔化的45-48℃

4．将平皿置于(36±1)℃温箱培养48h，计数菌落数。

5．计算公式：细菌总数(cfu／cm2)=平板上菌落数×稀释倍数／60(cm2)

(二)细菌种类鉴定

1．将无菌增菌肉汤培养液试管置于(36±1)℃温箱培养24-48h。

2．若无菌增菌肉汤培养液试管浑浊，应根据实际情况选择血平板、中国蓝平板、双S平板、

麦康凯平板或各种商用快速筛选平板进行细菌接种。

3．接种后将平板置于(36±1)℃温箱培养24-48h，挑取可疑菌落进行微生物学鉴定，必要

时做药敏。

六、注意事项

1．结果判定：卫生手消毒后细菌总数应≤10cfu／cm2；外科手消毒细菌总数应≤5cfu／cm2。

2．应根据所用方法，选择含相应中和剂的无菌洗脱液。

3．倾注时温度必须控制在45-48℃

4，当怀疑医院感染暴发或流行与手的传播有关时，监测目的在于考察实际工作中医务人员手卫生状况，虽然同样在接触患者前或进行诊疗活动前采样，但医务人员不一定进行了手卫生。

5．当怀疑医院感染暴发或流行与手传播有关时目标微生物的监测只能定性不能定量。

主要参考文献：

中华人民共和国消毒技术规范(2002年版)

医院感染管理办法(2006年)

环境微生物监测标准操作规程（SOP）

一、适用范围

监测消毒液(含氯消毒液和戊二醛等)细菌学情况。

二、监测时机

使用中的消毒液。

三、基本方法

琼脂倾注法(细菌学)。

四、基本试剂

1．PBS缓冲液(无水磷酸氢二钠2．85g，磷酸二氢钾1．36g，蒸馏水1000m1)。

2．缓冲液A(PBS缓冲液+甘氨酸2g)：用于醛类、碘类消毒剂。

3．缓冲液B(PBS缓冲液谎代硫酸钠趣)：用于过氧乙酸、含氯制剂。

五、操作步骤

(一)细菌学监测

1．用无菌移液管吸收使用中消毒液1m1，加入9ml含相应中和剂的缓冲液中，充分混匀，作

用约10min。

2．再用无菌吸管分别吸取上述lml的待检样本，置于2个直径为90mm的灭菌平皿内。

3．加入已熔化的45-48℃

4．其中一个平板置于(25±1)℃温箱培养7日，观察霉菌生长情况；另一个平板置于(36

±1)℃温箱培养72h，记数菌落数，必要时做致病菌(金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌等)

的检测。

5．计算公式：消毒液染菌量(cfu／m1)=每个平板上的菌落数×10

(二)细菌种类鉴定

1．从营养琼脂中挑取可疑菌落，根据实际情况可选择血平板、中国蓝平板、双S平板、麦康

凯平板或各种商用快速筛选平板进行细菌接种。

2．接种后将平板置于(36±1)℃温箱培养24-48h，挑取可疑菌落进行微生物学鉴定，必要

时做药敏与分子生物学分型。

六、注意事项

1消毒液染菌量结果应≤100cfu／ml，不得检出致病菌。

2必须选择含相应中和剂的稀释液进行采样，稀释液与消毒液作用时间不少于10min。

3倾注时琼脂温度保持在45-48℃

中华人民共和国消毒技术规范(2002年版)

医院感染管理办法(2006年)

洗手、卫生手消毒标准操作规程（SOP）

一、术语和定义

1、洗手：医务人员用肥皂(皂液)和流动水游毛去除手部皮肤污瞩、碎『新口部分致病菌的过程。

2、卫生手消毒：医务人员用速干手消毒剂揉搓双手，以减少手部暂居菌的过程

二、配备洗手与卫生手消毒设施

1、流动水。

2、非手触式水