岛津LC-10AT型HPLC操作规程.pptVIP

二、样品*采用过滤或离心方法处理样品，确保样品中不含固体颗粒；用流动相或比流动相弱（若为反相柱，则极性比流动相大；若为正相柱，则极性比流动相小）的溶剂制备样品溶液，尽量用流动相制备样品液；手动进样时，进样量尽量小，使用定量管定量时，进样体积应为定量管的3～5倍；321三、色谱柱*使用前仔细阅读色谱柱附带的说明书，注意适用范围，如pH值范围、流动相类型等；使用保护柱；使用符合要求的流动相；如所用流动相为含盐流动相，反相色谱柱使用后，先用水或低浓度甲醇水（如5％甲醇水溶液），再用甲醇冲洗。三、色谱柱*色谱柱在不使用时，应用甲醇冲洗，取下后紧密封闭两端保存；01不要高压冲洗柱子；02不要在高温下长时间使用硅胶键合相色谱柱；使用过程中注意轻拿轻放。03开机操作：四、操作过程*打开电源，用Harb相连接时，注意Harb电源，打开计算机，打开BootpServer（一般启动时已打开）；（2）、自上而下打开个组件电源，BootpServer里显示有信号时（有六行字符），打开工作站（先打开Online）；打开冲洗泵头的10％异丙醇溶液的开关（需用针捅抽），控制流量大小，以能流出的最小流量为准；四、操作过程*（4）、注意各流动相所剩溶液的容积设定，若设定的容积低于最低限会自动停泵，注意洗泵溶液的体积，及时加液；（5）、使用过程中要经常观察仪器工作状态，及时正确处理各种突发事件。四、操作过程*先以所用流动相冲洗系统一定时间（如所用流动相为含盐流动相，必须先用水冲洗20分钟以上再换上含盐流动相），正式进样分析前30min左右开启D灯或W灯，以延长灯的使用寿命；建立色谱操作方法，注意保存为自己命名的Method，勿覆盖或删除他人的方法及实验结果；四、操作过程*溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎，在更换流动相时注意保护，当发现过滤头变脏或长菌时，不可用超声洗涤，可用5%稀硝酸溶液浸泡后再洗涤；使用手动进样器进样时，在进样前和进样后都需用洗针液洗净进样针筒，洗针液一般选择与样品液一致的溶剂，进样前必须用样品液清洗进样针筒3遍以上，并排除针筒中的气泡；四、操作过程*实验结束后，一般先用水或低浓度甲醇水溶液冲洗整个管路30分钟以上，再用甲醇冲洗。冲洗过程中关闭D灯、W灯；01关机时，先关闭泵、检测器等，再关闭工作站，然后关机，最后自下而上关闭色谱仪各组件，关闭洗泵溶液的开关；02四、操作过程*使用者须认真履行仪器使用登记制度，出现问题及时向老师报告，不要擅自拆卸仪器。未经操作培训，不得擅自使用仪器。自己总结的12条

注意事项以下12条注意事项是自己在安装和使用液相色谱仪中的经验得出的，可能存在某些片面性，如有不当之处请多提宝贵建议。流动相过滤后要用超声波脱气，脱气后应该恢复到室温后使用。流动相必须用HPLC级的试剂，使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45um或更细的膜过滤)。不能用纯乙腈作为流动相，这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。使用缓冲溶液时，做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时，然后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上，以充分洗去离子。对于柱塞杆外部，做完样品后也必须用去离子水冲洗20ml以上。12长时间不用仪器，应该将柱子取下用堵头封好保存，注意不能用纯水保存柱子，而应该用有机相(如甲醇等)，因为纯水易长霉。每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂(如甲醇)等清洗进样器。12C18柱绝对不能进蛋白样品，血样、生物样品。堵塞导致压力太大，按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查并清洗。清洗方法：①以异丙醇作溶剂冲洗；②放在异丙醇中间用超声波清洗；③用10％稀硝酸清洗。。→突然容易突然容易*第一节岛津LC-10AT型HPLC操作规程

01目的:规范岛津LC-10AT型高效液相色谱仪的使用。02范围:适用于岛津LC-10AT型高效液相色谱仪的使用。03职责:操作员对本规程的实施负责。一、系统组成*本系统由1个LC-10ATvp溶剂输送泵、Rheodyne7725i手动进样阀、SPD-10Avp紫外-可见检测器、N2000色谱数据工作站和电脑等组成，另外还包括打印机。二、准备*、准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20min。、根据待检样品的需要更换合适的色谱柱（注意方向）和定量环。配制样品和标准溶液，用合适的0.45μm滤膜过滤。（注意腐蚀性与有机系的的溶剂）、检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。*接通电源，依次开启不间断电源