细菌和病毒的遗传转化接合.ppt

具有F因子的菌株可作为供体，F因子中有控制F性伞毛(Fpillus)形成的基因。F性伞毛是由供体细胞表面伸出的一种长附属物，与受体细胞接合，就成为两个细胞之间原生质的通道，叫接合管(conjugationtube)。接合现象P217图10-16第30页，共46页，星期日，2025年，2月5日F因子及其在杂交中的行为F因子在宿主染色体上有许多特定的插入位点和方向，整合频率为每代10-5～10-7。性伞毛形成结合桥/管，产生核酸内切酶，该酶在oriT转移起始点处一条单链上切开一个口，供体DNA从5′末端开始向受体转移。P218-220第31页，共46页，星期日，2025年，2月5日接合过程：F＋和F－的杂交细菌间接触→接合管形成→单链断裂—单链DNA从供体向受体转移→环化（F+→F-）或DNA双链的形成（部分二倍体）（Hfr→F-）→重组交换（奇偶次交换）。第32页，共46页，星期日，2025年，2月5日接合过程：F＋和F－的杂交第33页，共46页，星期日，2025年，2月5日F因子的特点F＋细菌可以把F因子传给后代。F＋细菌经吖啶橙处理F因子丢失，丢失后不再出现。F＋可以和F－杂交，而不能和F＋杂交。F＋和F－杂交后代皆为F＋，而且可以以10－7频率获得重组体后代。第34页，共46页，星期日，2025年，2月5日Hfr和F－杂交仅有一部分F因子（近原点处）被转移；受体获得完整的F因子--这种情况频率非常低。高频重组：细菌重组子频率为10－4。P219第35页，共46页，星期日，2025年，2月5日接合过程：Hfr和F－杂交第36页，共46页，星期日，2025年，2月5日细菌重组特点：只有偶数次交换才能产生平衡的重组子。相反的重组子不出现，所以在选择性培养基上只出现一种重组子。部分二倍体/部分合子图10-18细菌部分二倍体的形成及单交换和双交换的结果知识要点：p219第37页，共46页，星期日，2025年，2月5日奇偶次交换第38页，共46页，星期日，2025年，2月5日关于细菌和病毒的遗传转化接合第1页，共46页，星期日，2025年，2月5日细菌的遗传重组一、转化二、接合三、性导四、转导一个细菌细胞的DNA与另一个细菌细胞的DNA的交换重组可以通过4种方式进行P213第三节细菌的遗传分析第2页，共46页，星期日，2025年，2月5日一、转化(transformation)概念：某些细菌(或其他生物)能通过其细胞膜摄取周围供体(donor)的染色体片段，并将此外源DNA片段通过重组整合到自己染色体组的过程。只有当整合的DNA片段产生新的表现型时，才能测知转化的发生。转化中接受供体遗传物质的称为受体(receptor)。P213(一)、细菌转化实验(二)、转化过程(三)、转化在遗传分析中的应用第3页，共46页，星期日，2025年，2月5日(一)、细菌转化实验1.基础知识荚膜菌落毒性类型光滑型S发达光滑有I,II,III粗糙型R无粗糙无I,II野生型肺炎双球菌的菌落?一种突变型为粗糙型?两者根本差异在于荚膜形成；荚膜的主要成分是多糖，具特殊的抗原性；不同抗原型是遗传的、稳定的，一般情况下不发生互变。第4页，共46页，星期日，2025年，2月5日2.Griffith转化研究P213第5页，共46页，星期日，2025年，2月5日Griffith对其试验结论及发展根据上述研究结果Griffith认为：(有毒)死细菌中的某种物质转移到(无毒)活细菌中，并使之具有毒性，导致小家鼠死亡。他将这种细菌遗传类型的转变称为转化，并将引起转化的物质称为转化因子(tranformingprinciple)。以后一些研究者重复上述试验，并且加入了体外培养试验，即：将加热杀死的SIII细菌与无毒RII细菌混合培养，然后注入小家鼠体内，同样导致家鼠死亡。表明：细菌在培养条件下也能够实现遗传类型间的定向转化。第6页，共46页，星期日，2025年，2月5日3.阿维利(Avery)等的转化实验(1944)实验结果：来源于加热杀死的SIII细菌，并使RII细菌转化成为SIII型细菌的转化因子是DNA。第7页，共46页，星期日，2025年，2月5日实验结论转化定义：某一基因型的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型的DNA而使它的基因型和表现型发生变化的现象称为转化。Avery等人的实验也表明：决定细菌遗传类型的物质是DNA，即证明了DNA就是遗传物质。（p36）由于他们采用的实验方法当时不被人们广泛