基因工程的基本操作程序（第1课时）课件-高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx

第2节基因工程的

基本操作程序

第1课时;;普通棉花;培育转基因抗虫棉的简要过程;一、目的基因的筛选与获取;;2.;基因文库的类型;含有某种生物部分基因片段的重组DNA的克隆群体。;质粒;文库类型;④利用PCR获取和扩增目的基因;1.说出PCR的概念、原理、目的、优点。

2.结合体内DNA复制过程，思考PCR的进行需要哪些条件？所需设备是什么？

3.构建出PCR的大致过程；PCR扩增为什么需要引物？

4.如何对产物进行鉴定？PCR技术与DNA复制过程有哪些异同？

;PCR扩增;DNA复制的条件:;引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸。用于PCR的引物通常为20~30个核苷酸。在细胞中为一段单链RNA，在PCR中为一段人工合成的单链DNA。;微量离心管;3.过程;;DNA解链为单链;第一轮循环的产物作为第二轮反应模板，经过变性、复性和延伸三步产生第二轮循环产物。;;4.PCR相关计算;中长链-短链DNA____个;中长链-短链DNA____个;中长链-短链DNA____个;扩增次数;4.PCR相关计算;1.复性过程一定是引物与DNA模板链结合吗？;2.延伸时需要加入两种引物，原因是什么？;PCR引物的设计;2.引物设计的原则;（4）复性温度

复性温度高，扩增特异性强，复性温度低，扩增效率高。

如果引物碱基数较少，可以适当提高复性温度，这样可以使PCR的特异性增加；如果碱基数较多，那么可以适当降低复性温度，使DNA双链结合。一对引物的复性温度相差4℃～6℃不会影响PCR的产率，但是理想情况下一对引物的复性温度是一样的。;2.引物设计的原则（小结）;5.产物鉴定