生物化学第9章酶促反应动力学.pptVIP

因酶蛋白变性而酶活力丧失称为酶的失活作用，而因为某种物质与酶结合使酶活力丧失称为酶的抑制作用，酶受抑制丧失活力时酶蛋白并没有变性。能抑制酶活力的物质称为酶的抑制剂（inhibitor）。研究酶的抑制作用是研究酶的结构和功能、酶的催化机制，以及阐明代谢途径的基本手段，也可以为医药设计新药物和为新农药的研制提供理论依据。三、酶的抑制作用1相对活力分数（残余活力分数）2相对活力百分数（残余活力百分数）3抑制分数（被抑制而失去活力的分数）4抑制百分数抑制程度的表示方法抑制剂与酶活性中心的基团以共价键结合，不能用透析、超滤、凝胶过滤等物理方法去除。1．不可逆抑制作用（irreversibleinhibition）抑制剂与酶活性中心的基团以非共价键结合，可以用透析、超滤、凝胶过滤等物理方法去除而使酶恢复活力。2．可逆抑制作用（reversibleinhibition）抑制作用的类型可逆抑制作用的3种类型（1）竞争性抑制（competitiveinhibition）I和S竞争与酶的活性中心结合，二者只能结合一个。竞争性抑制剂通常是底物类似物，它可以与酶结合，但不能被酶催化发生反应。竞争性抑制剂举例可逆抑制作用的3种类型非竞争性抑制（noncompetitiveinhibition）I与S可以分别与酶结合，谁先结合都可以，形成ESI三元复合物，但ESI中的S不能转变成产物。这类抑制剂是与酶活性中心之外的某个部位结合。竞争性和非竞争性抑制剂的抑制机理可逆抑制作用的3种类型（3）反竞争性抑制剂（uncompetitiveinhibition）I只与ES结合，只有ES能分解出产物，ESI中的S不能转变成产物。由于I的存在促进了E和S的结合，所以称为反竞争性抑制。ES+I→ESI——→P+E+I×可逆抑制作用和不可逆抑制作用的动力学鉴别①在反应系统中加入一定量的抑制剂，以及不同量的酶，测定反应速率与酶量的关系。斜率较小的直线是可逆抑制剂，不通过原点但斜率与对照相同的是不可逆抑制剂。1.control2.irreversibleinhibitor3.reversibleinhibitor可逆抑制作用和不可逆抑制作用的动力学鉴别在反应系统中加入不同量的酶及抑制剂，作不同抑制剂浓度下反应速率对酶量的直线。可逆抑制剂得到的是一组通过原点但斜率不同的直线，不可逆抑制剂得到的是一组不通过原点但斜率与对照相同的平行线。有机磷化合物有机汞、有机砷化合物重金属盐烷化试剂氰化物、硫化物和CO青霉素（1）非专一性不可逆抑制剂Ks型不可逆抑制剂Kcat型不可逆抑制剂（2）专一性不可逆抑制剂一些重要的不可逆抑制剂有机磷化合物很多农药是有机磷化合物，它们能抑制某些蛋白酶及酯酶的活力，与酶分子活性部位的丝氨酸羟基共价结合而使酶失活。这类化合物强烈地抑制胆碱酯酶活力，使乙酰胆碱不能水解成乙酸和胆碱，导致乙酰胆碱积累，引起神经中毒症状。所以这类化合物又称为神经毒剂。用解磷定（碘化醛肟甲基吡啶）或氯磷定（氯化醛肟甲基吡啶）能把酶上的毒剂夺取下来，使酶恢复活力，达到解毒的作用。有机磷化合物解磷定的解毒机理有机汞化合物有机汞化合物能与酶的巯基结合而使酶失活。过量的半胱氨酸或还原型谷胱甘肽能解毒。有机砷化合物有机砷化合物能与酶的巯基结合而使酶失活。BAL（二巯基丙醇）能解毒。路易斯毒气为了六十一个阶级兄弟第9章酶促反应动力学一、化学动力学基础二、底物浓度对酶反应速率的影响三、酶的抑制作用四、温度对酶反应的影响五、pH对酶反应的影响六、激活剂对酶反应的影响(kineticsofenzyme-catalyzedreaction)研究酶促反应动力学的意义酶促反应动力学是研究酶促反应的速率以及影响此速率的各种因素的科学。在研究酶的结构与功能的关系以及酶的作用机制时，需要动力学提供实验证据；为发挥酶催化反应的高效率，寻找最有利的反应条件；为了解酶在代谢中的作用和某些药物的作用机制等，都需要掌握酶促反应速率的规律。二、底物浓度对酶反应速率的影响酶反应速率对底物浓度作图02S+EES→P+E01为了解释这个现象，Henri和Wurtz提出了酶－底物复合物学说。该学说认为，当酶催化反应时，酶首先与底物结合，生成酶－底物复合物，然后生成产物，并释放出酶。反应用下式表示：中间复合物学说1电子显微镜和X光衍射直接观察到酶与底物的复合物。2酶与底物结合后光谱发