益气养阴健脾法改善昼夜节律失调引起的胰岛素分泌受损.doc

1.1研究意义：为益气养阴健脾法改善昼夜节律失调引起的胰岛素分泌受损提供科学依据

中医学防治疾病的目的是恢复机体自身阴阳平衡，维持机体稳定状态，而并非以单纯某项指标达到正常值作为治疗目标。现代社会，由于长期加班熬夜等不良生活方式，因昼夜节律失调引起糖耐量异常，胰岛素分泌受损的人群增多，而目前西医降糖药物的优势在于能够快速有效的降糖，但在糖尿病前期，并无很好的方法能够保护或恢复由昼夜节律失调引起的胰岛素分泌受损，阻止进一步发展成为2型糖尿病。前期研究发现，具有益气养阴健脾功效的参芪复方是临床上对改善胰岛素分泌受损有效的验方，本次研究将从分子生物学的角度着手，探索益气养阴健脾法在改善昼夜节律失调引起的胰岛素分泌受损中的重要性及应用的科学性，从而推动该法的临床应用。

1.2研究的必要性

2017年诺贝尔生理学或医学奖得主“发现控制昼夜节律的分子机制”。生物钟是生物体内周而复始的节律，与能量代谢密切相关。在高速发展的现代社会，人们生活节奏紧张，大部分人经历着节律紊乱（包括夜班工作、跨时区出差、晚餐延迟、睡眠时间和质量下降等等）。流行病学研究发现，生活节律紊乱导致代谢异常、增加发生2型糖尿病的风险，即使短时间夜班工作也会引起胰岛素分泌受损，进而发展成为2型糖尿病。胰岛β细胞功能进行性衰竭是2型糖尿病的关键发病机制。β细胞代偿能力下降，血糖升高，发生临床糖尿病。UKPDS研究早已发现2型糖尿病患者在刚刚被诊断时胰岛素分泌能力已经下降50%，以后逐渐下降，大约每年下降4.5%[1]。

目前，常规西药强化降糖仍是临床主流手段，主要以胰岛素皮下注射或口服降糖药为主，但在糖尿病前期，并无很好的方法能够保护或恢复由昼夜节律失调引起的胰岛素分泌受损，阻止进一步发展成为2型糖尿病。中医药的调节作用异于西药降糖的强制性，其特点在于纠正各种致病因素导致的内环境不稳定，使得机体及时恢复稳态。我们在临床实践中发现中医药有着整体调节和减少血糖波动的独特优势，有望作为糖尿病中医治疗的新突破口。

1.3国内外研究现状

1.3.1昼夜节律失调导致胰岛功能受损

昼夜节律失调可能会增加糖尿病的风险和炎症［2］。连续暴露于夜间光线可引起体内明暗周期变化，破坏胰岛昼夜节律钟的功能振荡而胰岛分泌脉冲质量减少，导致葡萄糖刺激的胰岛素分泌减低［3］。同时生物钟紊乱和饮食导致的肥胖共同促进β细胞衰竭，这可能是胰岛时钟受损的结果［4］。慢性睡眠紊乱可导致胰岛核心生物钟基因表达改变，进而导致胰岛分泌功能障碍，糖代谢紊乱。

总而言之，胰岛素释放具有昼夜节律性，胰岛β细胞及相关细胞系中时钟基因的紊乱均可导致胰岛素释放受损，最终引起血糖增高。胰岛素分泌的昼夜节律调节受损是人类T2DM发展的特征，并且最近被证明归因于受损的胰岛昼夜节律时钟功能。［5］

1.3.2生物钟基因Clock可能通过cAMP/PKA信号通路调节胰岛素分泌

胰岛是主要的胰岛素敏感组织，有研究表明时钟基因Clock在6-8周SD大鼠多种器官和组织中mRNA表达水平不同，在胰岛、肌肉组织中的相对表达量较高[6]。众所周知，胰岛细胞分泌的胰岛素和胰高血糖素是维持葡萄糖稳态至关重要的内分泌信号，在人和动物中，血浆胰岛素水平均呈现昼夜变化，而且这种昼夜振荡节律与空腹以及摄食行为无关。同时，在小鼠和人胰岛细胞中也观察到胰岛分泌的自主节律性。提示胰腺具有自己的自主昼夜节律时钟，且血浆胰岛素的昼夜变化与胰岛素分泌相关基因的转录振荡息息相关。

最近的研究表明，SIRT1通过BMAL1和PER2等关键生物钟调节因子的相互作用和去乙酰化来调节昼夜节律基因表达的幅度和持续时间。[7]慢性睡眠紊乱可导致胰岛核心生物钟基因表达改变，进而导致胰岛分泌功能障碍，所以CLOCK，BMAL1和其他核心时钟转录因子在胰岛组织内起作用，胰腺内源性时钟基因表达的改变是导致胰腺功能受损的重要原因。所以有人推测胰岛分泌功能的受损与胰腺内源性时钟基因紊乱相关，但分子时钟调控节律性胰岛素分泌的具体机制尚不明了，而昼夜节律失调改变了昼夜节律调节基因的表达。[8]

已有研究证实，cAMP/PKA信号传导途径可在多个方面调节葡萄糖稳态[9,10]，包括胰岛素和胰高血糖素分泌。既往有研究表明中药改善胰岛素分泌受损可能是由于增加钙离子通道蛋白的表达，其可能的分子途径包括cAMP-PKA-CREB通路[11]。研究表明cAMP/PKA可作用于GPCR的下游，并调节参与胰岛素分泌关键分子的活性[12]。也有研究表明Clock对INS-1细胞基础胰岛素分泌没有影响，而影响高糖刺激下的胰岛素分泌过程，其可能是cAMP/PKA信号通路通过调节β细胞CaV1通道的活性影响胰岛素分泌。那么，生物钟基因Clock可能是通过cAMP/PKA信号通路调节高糖刺激下的胰岛素分泌过程[6]。因而，CL