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圆盘电泳技术:原理、方法与应用;课程目标与学习要点;什么是圆盘电泳;圆盘电泳的发展历史;圆盘电泳的基本原理;电泳迁移的物理基础;影响电泳的主要因素;电场强度的作用;pH值的影响;温度对电泳的影响;分子量与电泳速率的关系;圆盘电泳的特点;与平板电泳的比较;圆盘电泳的优势;圆盘电泳的局限性;实验设备介绍;电泳槽的结构;玻璃管的制备要求;;实验材料准备;聚丙烯酰胺的配制;缓冲液的选择与配制;样品的制备方法;实验步骤详解(1):凝胶制备;实验步骤详解(2):样品处理;实验步骤详解(3):上样技术;实验步骤详解(4):电泳过程;实验步骤详解(5):染色与脱色;连续系统电泳;不连续系统电泳;缓冲液系统的选择;凝胶浓度的优化;上样量的确定;电压调节技巧;常见问题与解决方案;凝胶聚合不良的处理;条带拖尾的预防;分辨率不足的改善;染色效果不佳的处理;;;分子量的测定方法;定量分析技术;结果判读要点;图像采集与处理;数据可重复性分析;质量控制措施;应用案例分析(1):蛋白质分离;应用案例分析(2):核酸分析;应用案例分析(3):氨基酸测定;新技术发展趋势;自动化电泳系统;微型电泳技术;高通量分析方法;实验室安全注意事项;化学试剂的安全处理;仪器使用的安全规范;废弃物处理指南;实验记录的规范要求;数据存档与管理
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