2023年人教版高中生物课堂笔记生物选修.pdfVIP

生物选修三知识点

专题1基因工程

基因工程的概念

基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因术，

赋予生物以新的遗传特性，发明出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工

程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组术。

(一)基因工程的基本工具

1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制制)

(1)来源：重要是从原核生物中分离纯化出来的。

(2)功能：可以辨认双链DNA分子的某种特定的核普酸序列，并且使每一条链中特定部

位的两个核甘酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。

(3)结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。

2.“分子缝合针”——DNA连接薛

⑴两种DNA连接酶(E・coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶)的比较:

①相同点：都缝合磷酸二酯键。

②区别：E・coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间

的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率

较低。

⑵与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核昔酸加到已有的核甘酸片段的末端,

形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。

3.“分子运送车”——邀隹

(1)载体具有的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。

②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。

③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。

(2)最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简朴的、独立于细菌染色体之外，并

具有自我复制能力的双链环状DNA分子。

(3)其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒

(二)基因工程的基本操作程序

第一步：目的基因的获取

1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。

2.原核基因采用直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有

反转录法一和化学合成法

3.PCR术扩增目的基因

(1)原理:DNA双链复制

(2)过程：第一步：加热至90〜95℃DNA解链；第二步：冷却到55〜60C,引物结合到

互补DNA链；第三步：加热至70〜75℃,热稳定DNA聚合从引物起始互补链的合成。

第二步：基因表达载体的构建

1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因可以

表达和发挥作用。

2.组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因

(1)启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合辨认和结

合的部位，能驱动基因转录出mRNA,最终获得所需的蛋白质。

(2)终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。

(3)标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否具有目的基因，从而将具有目的基因

的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。

第三步：将目的基因导入受体细胞一

1.转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过

程。

2.常用的转化方法:

将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，另一方面尚有基因枪法

和花粉管通道法等。

将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。此方法的受体细胞多是受

精卵。

将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的因素是繁殖快、多为单细胞、遗

传