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现代生物技术在生物活性物质开发中的应用.pptVIP

现代生物技术在生物活性物质开发中的应用.ppt

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紫杉醇是从短叶红豆杉树皮中提取的天然二萜类抗癌活性物质.临床表明,紫杉醇不仅对晚期和复发性卵巢癌、转移乳腺癌、霍奇金淋巴瘤、头部和颈部癌有明显的疗效,而且对类风湿性关节炎、老年性痴呆等疾病也有很好的疗效。但是由于紫杉醇在红豆杉植物细胞中的含量极低,要治好一个卵巢癌病人,至少需要2一3棵60年龄的此种树的树皮。这种树属于稀有树种,且生长很慢,若不断取用的话,很快就要面临濒危的境地。为了克服这一问题,美国研究人员建立了快繁紫杉细胞株系,生产出的紫杉醇产量是从树皮中提取产量的2-4倍。紫杉醇存在于红豆杉属植物的树皮、叶及茎中,其中树皮中的含量最高,大约从12000株成年紫杉树中才能提取1KG的紫杉醇,而且紫杉的生长周期很长,在世界分布很少紫杉醇的国际市场价格为450美元/g红豆杉惨遭剥皮生地黄熟地黄夏枯草饮片原植物当归头当归身当归尾当归片分子生物学技术鉴定中草药传统的生药鉴定方法是外观性状鉴别,以后又发展为显微鉴别和理化鉴别,但这些方法都各有其局限性。而作为当今世界生命科学领域中最活跃和最具前途的学科―分子生物学,正逐渐在中药鉴定工作中得到广泛应用。除矿物类药材外,来源于动、植物的中药均含有决定其生物学特性的遗传物质墓因,由于基因中DNA的多态性的特点,构成了物质表型的多样性。分子生物学的发展使人们能从干燥药材中提取DNA.以DNA多态性为基础,根据不同种属间药材DNA的变异情况,揭示其亲缘关系,从而对生药和合成生药的中成药及其基原进行真伪优劣鉴定。由于DNA分析技术是针对生物的遗传物质进行鉴别.其结果不受环境因素、样品形态和材料来源的影响,因此这项技术为中药鉴定提供了更加准确可靠的手段。1.3DNA指纹图谱技术DNA指纹图谱技术及其在中药研究中的应用作为中药指纹图谱的一个组成部分,DNA指纹图谱这一现代分子生物学技术在现代中药研究中有其独特的作用。DNA指纹图谱技术在药材鉴别、道地药材研究、遗传育种和种质资源研究及中成药质量控制等领域有重要价值和广阔的应用前景。核苷酸序列是生命有机体构建、维持和繁殖生命所必需的遗传信息。不同种生物体含有不同的DNA序列,同种生物体既有相同的DNA序列,保持同种生物体的遗传性状,又具有多态性,这种多态性可以是个体、种属或变异等引起的,它使得同种生物中的各个体千差万别,生物多样性正是由于其基因多态性的结果。01由于这种核苷酸序列是相对稳定的,因而可以利用现代分子生物学技术构建DNA指纹图。02DNA指纹图谱的概念将生物体DNA模板进行PCR扩增,不同生物体得到的DNA片段的大小、数目不同,再将这种扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,电泳结果显示的DNA带型差异在紫外下成像,从而得到DNA指纹图。01DNA指纹图谱具有高度的个体特异性。在分子水平上检测基因多态性,比形态、组织和化学水平上检测更能代表其变异类的遗传标记,其鉴别结果更加准确可靠。02DNA指纹技术灵敏度高,如果选择合适的扩增引物,其结果的重复性也非常好。限制性片段长度多态性(简称RFLP)随机扩增多态性DNA(简称RAPD)任意引物PCRPCR-RFLPRAPD-RFLP应用于中药研究的DNA指纹技术有:DNA指纹图谱技术是在分子水平上、以药材基因型特征为鉴定指标的一种新技术。01它直接分析遗传物质本身,是分析生物的基因型而非表现型,排除了环境因素给药材鉴定带来的干扰,也不受样品形态(药材原植物、饮片或粉末)和材料来源的影响,比传统的方法(性状、显微、化学、理化鉴定)更准确可靠。02DNA指纹图谱在中药研究中的应用它不仅能区分相近物种(同科、同属不同种),而且可以检测外型极为相似的同种不同变种、变型、品系、化学型乃至个体之间的DNA的细微变异。这一技术近年来正越来越广泛地被应用于中药研究中。”IIIIII诃hē子小诃子大诃子绒毛诃子为清凉解毒中药,主治久泻;久痢;脱肛;喘咳痰嗽;久咳失音。人参须根人参主根不同产地高良姜的气相指纹图谱在药效学指导下进行研究,保证指纹图谱反映的化学成分包括中药材中有效部位所含的绝大部分成分或有效成分的全部。01样品的预处理过程及测定方法应简便、经济、易行,且专属性、准确度与重现性好。02指纹图谱研究过程中的注意事项:药用植物细胞组织和器官培养01植株再生02植物有效成分的生产03毛状根培养和增殖技术04植物活性成分的生物转化05药用植物的快速繁殖06多倍体育种071.4生物活性物质的细胞工程1.药用植物细胞组织和器官培养植物细胞具有全能性,即单个细胞在适宜的环境下可分化发育成植株,并具有整

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