细菌的形态与染色.pptVIP

一.录像：微生物学发展史二.实验室规则介绍（生物安全）三.细菌形态示教及示教操作四.学生操作：革兰染色法（Gramstain)五.作业实验室规则介绍（生物安全）牢固树立“有菌观念”严格执行“无菌操作”严防“杂菌污染”实验室规则介绍（生物安全）一.安全使用水、电、煤二.保持实验室安静有序、爱护实验器材三.培养良好习惯，树立自我保护意识穿实验服不在实验室内吃东西不将任何实验材料（如细菌涂片、细菌培养物）携带出实验室若有传染性材料污染桌面、地面、书、衣物或人体，应立即报告教师，并在教师指导下进行消毒处理实验结束后，清洗消毒（0.1%新洁尔灭溶液中浸泡）双手后方可离开实验用过的物品归还原处，带有传染性的吸管、玻片等，必须放在指定地点做好实验室清洁卫生工作实验室规则介绍（生物安全）细菌的大小及排列细菌的基本结构细菌的形态结构荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢细菌的染色检查法细菌的特殊结构细菌形态示教及示教操作细菌形态示教——荚膜肺炎球菌荚膜（capsule）细菌形态示教——鞭毛、菌毛菌毛pilus电镜下变形杆菌周身鞭毛flagellum光学显微镜下细菌形态示教——芽孢电子显微镜下形态光学显微镜下形态破伤风杆菌芽孢endosporeofC.tetani1G+菌G-菌2等电点PI2~3PI4~53负电荷多带负电荷少4通透性低高5肽聚糖多，脂质少肽聚糖少，脂质多6精不易进入酒精易进入Gramstain原理别细菌：分成G+菌和G－菌01与致病性有关：G+菌产生外毒素G－菌产生内毒素03选择药物：G+菌和G－菌对抗菌药物敏感性不一样02Gramstain意义学生操作：两人一组01材料：两人一组02菌种：03表皮葡萄球菌及大肠杆菌斜面各一支04玻片每人1张05革兰染色液一套06接种环每人一支07革兰染色法Gramstain基本过程：涂片干燥固定01染色02革兰染色法Gramstain接种棒冷却事先加好NS量少涂片制备：按下图分别加生理盐水各一滴，再按下图分别加菌研匀菌1菌1+菌2菌201030204革兰染色法GramstainSTEP03STEP01STEP02玻片不含油脂(若有油脂可用卷筒纸蘸95%酒精擦干净)。生理盐水应尽量少加。取菌不宜过多。制备一张好涂片的基本要素：革兰染色法Gramstain固定：热固定（火焰上来回通过3次固定）3124使细胞质凝固,以固定细胞形态,并使之牢固附着在载玻片上。杀死细菌，操作更安全干燥：自然干燥或烘干（标本面朝上）目的：涂片结晶紫初染1min碘液媒染1min95%酒精脱色30s复红复染30s水洗，干革兰染色全过程示意图（紫碘酒红，11半半，每次水洗，阳紫阴红。）水洗，干烘干,油镜检水洗，干水洗，干水洗，干01目的02材料与方法03结果（需用彩笔画示意图）04分析与讨论作为平时成绩记入总成绩实验报告（格式）细菌生长周期的影响脱色是关键菌液涂片不能太厚革兰染色影响因素分析