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药敏试验的错误来源(二)体内、体外试验的不一致性某些菌测某些药,结果有误头孢菌素、氨基糖甙类:沙门菌、志贺菌头孢菌素:李斯特菌属头孢菌素、氨基糖、克林、TMP/SMZ:肠球菌Beta-内酰胺类:MRS即使敏感,也应报告耐药有些菌无标准化的药敏试验棒杆菌、芽胞杆菌、气单胞菌、巴斯德菌某些耐药机制需要多种检测方法诱导型:VanB,BushI型酶MRS的异质型表达ESBL药敏可能无法检出新出现的耐药,VISA问题菌和耐药机制药敏试验方法2-肉汤稀释法4 8 16 32 64128256ug/ml混混清抗生素倍比稀释,种菌105CFU/ml,孵育35℃,16-20h,判读调节离子浓度的MH肉汤优点:准确,可靠,可用于研究宏量肉汤法(2ml,13x100mm)微量肉汤法(0.1ml,微量板)自动化仪缺点:劳动强度大细菌生长情况不可查2341药敏试验方法2-肉汤稀释法药敏试验方法3-琼脂稀释法制备含对倍抗生素浓度梯度的平板,制备菌悬液,点种菌,104/每个点,孵育,判读结果浓度16 32 64128256ug/ml第二步第一步缺点:测多个药时劳动强度大制备平皿费时费力优点:金标准精确可靠可同时测定多株菌(40株)细菌生长情况可查药敏试验方法3-琼脂稀释法细菌生长区01test塑料02条03椭圆形04细菌生长05抑制区06256071280880901610判读抑菌浓度11(MICug/ml)12药敏试验方法4-Etest法优点连续浓度梯度,与琼脂稀释法相关性好影响因素少,稳定性高操作简单,省时缺点:昂贵用途:快生长菌,苛养菌,厌氧菌,酵母菌, 分枝杆菌药敏试验方法4-Etest法MIC50,MIC90,MIC均值,MIC范围,R,I,S单纯比较MIC50,MIC90是片面的,还要同时看平均MIC及MIC范围MIC50/MIC90:MIC从小到排列,位于第50/90百分位菌株的MIC值同时结合R,I,S,(不同药物血浓度不同,安全范围不同〕评价药物体外抗菌活性的指标抗生素细菌人体RESISTANCEPHARMACODYNAMICSINFECTIONIMMUNITYSIDEEFFECTSPHARMACOKINETICS抗生素、细菌、人体MIC:在与微生物生长速率有关的特定时间间隔内,通常是18-24小时,能够抑制被测菌生长的最低药物浓度。对倍稀释的优点:操作容易敏感株的MIC呈正态分布区分异常(R)与敏感(S)的菌群12药敏试验药敏试验折点的建立MIC的分布 药代动力学和药效学 定MIC的折点临床疗效和细菌清除率抑菌圈直径的分布…………定抑菌圈折点统计学的线性回归计算错误率:尽可能减少极重要误差(假敏感率)MIC的分布药代动力学:药物吸收,分布,代谢,排泄时间依赖型(%TMIC〕:β-内酰胺类,大环内酯类药效学:药物对机体的作用浓度依赖型(AUC/MIC比率〕:AGS,FQ这些参数可用于计算具有最佳药效的给药方案2341药代动力学和药效学01耐药中介敏感05Log2.MIC03I02R04S1d2抑菌圈直径(mm)06MIC与抑菌圈直径的线性关系抑菌圈直径与MIC的关系不同国家的判定折点
可能不同用药剂量不同,服药的间隔不同评价敏感时较保守更强调检测出耐药株(即特定的耐药群)技术因素:接种、培养基原因:敏感(Susceptible)耐药(Resistance)用常规用量治疗有效常规用药时达到的平均血药浓度超过细菌的MIC5倍以上。用常规用量治疗不能抑制细菌的生长MIC高于药物在血、体液中可能达到的浓度敏感性分类(NCCLS的定义)中介(Intermediate)MIC接近血、体液中药物的浓度,治疗反应率低于敏感株药物生理浓集部位有效(尿-FQ)加大用药剂量可能有效缓冲区:防止操作的系统误差造成重大结果的判定错误敏感性分类(2)半定量…纸片扩散法(抑菌圈直径)01MIC法:稀释法(肉汤、琼脂)自动化仪法抗生素连续
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