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博观而约取，厚积而薄发。——苏轼
局部毒性作用——皮肤致敏试验：
选择豚鼠作为实验动物。每天涂皮或皮内注射受试物溶液，共14天，此阶段称为诱导阶
段。间隔10～14天后，用激发剂量（通常低于诱导剂量）再皮内注射1次（称为激发阶段），
观察有无皮肤反应及反应程度并评分。
第四节皮肤致敏实验
一、实验材料
1.动物：选择豚鼠雌雄各半，体重在250-300g于给受试物前24小时将豚鼠背部两侧毛脱掉，
去毛范围每侧约3cm×3cm。
2.药物：若受试物是膏剂一般不稀释，可直接实验。若受试物为固体粉末，则需用适量水或适
宜的赋形剂（如羊毛脂、凡士林、橄榄油等）混匀以保证受试物与皮肤的良好接触。
3.阳性致敏物：2,4一二硝基氯代苯制成1％的致敏浓度和0.1％的激发浓度。
二、试验方法
1.局部封闭涂皮法致敏
⑴实验分组：将豚鼠按体重性别随机分成三组，每组10只（雌雄各半）。第一组给受试物，
第二组空白对照（给赋形剂），第三组阳性对照（给阳性致敏物）。
⑵致敏接触：取受试物0.1-0.2mg（或g）涂在动物左侧脱毛区，用适宜方法固定，持续6小
时。第7天和第14天，以同样方法重复一次。空白对照组与阳性对照组方法同上。
⑶激发接触：与末次给受试物致敏后14天，将受试物0.1-0.2m1(或g)涂于豚鼠背部右侧脱毛
区，６小时后去掉受试物，即刻观察，然后子24小时、48小时、72小时再次观察皮肤过敏反应情况，按
表评分（空白对照与阳性对照方法均同受试物）。
学而不知道，与不学同；知而不能行，与不知同。——黄睎
(4)结果判断与评价：实验结果按皮肤反应标准评分后，根据实验组与对照组豚鼠皮肤反应的差
别，按表16-5判断受试物对皮肤过敏反应性质。
为了反应受试物的致敏强度，可按表16-6的分类判断其致敏率。致敏率的计算是：将出现皮肤
红斑或水肿（不论程度轻重）的动物例数除以受试动物总数，即致敏率。
2.皮内法致敏：第一天在豚鼠背部一侧去毛区内注射被试药物溶液或乳剂0.05m1(0.1%），第
二天观察反应，第三天开始继续在同侧3cm×4cm去毛区内按同法给药，剂量增至每次0.1ml，给药日隔一
日进行，给药部位依次更换，如此给药9次。对照组不致敏。激发，末次致敏后14天在豚鼠背部另一侧
去毛区皮内注射0.05m1(0.1%）药物，24小时后观察反应，必要时在致敏后28天再重复进行第二次激发；
对照组作同样处理，该法的致敏剂量准确，对中等致敏强度的药物比较合适。
3.皮内和涂皮相结合的方法：致敏，第一天在豚鼠顶部（4cm×6cm去毛区的脊柱两侧从头向
尾成对称地作皮内注射；①0.lml福氏完全佐剂（由轻质石蜡油或月桂基硫酸钠分枝杆菌50-10即物！组
成，临用时加4:1羊毛脂或吐温80等乳化剂，经高压消毒后，再与等量盐水研磨成乳浊液）。②0.1m1
药物。③0.1rn1药物与福氏完全佐剂的等量混合物。第8天用2cm×4cm滤纸涂以适当赋形剂配成的药
物斑贴于豚鼠颈部的注射部位，持续封闭固定48小时作为第二次致敏，为加强致敏作用，对无皮肤刺激
作用的药物，可在第2次致敏前24小时用10%月桂基硫酸钠涂于斑贴处。对照组只用溶剂和赋形剂致敏、
激发，末次致敏后14-28天分别用2cm×2cm滤纸涂以药物及赋形剂，贴于豚鼠肩脚区左右两侧去毛区，
持续封闭固定24小时，激发后24小时和48-小时观察
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