新品上市 I THUNDER TR-FRET 磷酸化 RB.pdf

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新品上市ITHUNDERTR-FRET磷酸化RB

RB（RetinoblastomaProtein，视网膜母细胞瘤蛋白）是细胞周期调控中的关键蛋白，磷酸化RB在细胞周期调控、基因表达、肿瘤发生以及癌症免疫中扮演

着重要角色，其磷酸化状态的变化对细胞功能和疾病发展具有深远影响。

THUNDERTMTR-FRET时间分辨荧光共振能量转移是一种基于荧光共振能量转移（FRET，FluorescenceResonanceEnergyTransfer）和时间分辨荧光（TRF,

Time-ResolvedFluorescence）的技术，采用夹心法，检测胞内RB磷酸化水平和总RB水平。

图1：THUNDERTR-FRET检

测原理示意图

THUNDERPhospho-Rb(S780)

HT-29细胞（40000个细胞/孔；三复孔）饥饿24小时，在37°C，5%二氧化碳下连续稀释孵育20小时。数据显示，用Palbocicilib处理HT-29细胞可抑制

Rb在S780位点的磷酸化。Z’因子值在培养1h后测定，每个处理组共使用40孔。Z’因子值为0.72，表明该方法稳定，适用于高通量。

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图2：THUNDERTR-FRETPhospho-Rb(S780)检测数据

THUNDER™Phospho-Rb(S807/S811)

HT-29细胞（40000个细胞/孔；三复孔）饥饿24小时，在37°C，5%二氧化碳下连续稀释孵育20小时。数据显示，用Palbociclib处理HT-29细胞可抑制

Rb在S807/S811位点的磷酸化。培养1h后测定Z’因子值，每个处理组共使用48个孔。Z’值为0.9，表明该方法稳定，适用于高通量。

图3：THUNDERTR-FRETPhospho-Rb(S807/S811)检测数据

THUNDER™TotalRb

用Palbociclib处理HT-29细胞抑制总Rb，磷酸化Rb（S780）和磷酸化Rb（S807/S811）。GAPDH（作为对照测量）的水平保持稳定。

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图4：THUNDERTR-FRETTotal-Rb检测数据

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