DB22T 1255-2011 粮谷中玉米赤霉烯酮的快速测定方法超高效液相色谱法　　.docxVIP

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X04DB22

吉林省地方标准

DB22/T1255—2011

粮谷中玉米赤霉烯酮的快速测定方法超高效液相色谱法

Determinationofzearalenoneingrainsbyultrahigh-performanceliquidchromatography

2011-12-15发布2011-12-31实施吉林省质量技术监督局发布

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DB22/T1255—2011

前言

本标准编写的格式、结构和内容均按照GB/T1.1-2009给出的规则进行起草。

本标准的附录A为资料性附录。

本标准由吉林省粮食局提出并归口。

本标准起草单位：吉林省粮油科学研究设计院、国家粮食局科学研究院。

本标准主要起草人：朱铁军、王松雪、孟凡刚、李莉、王曼、矫珑、谢刚、张艳、张忠杰、曹阳、薛恩儒。

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DB22/T1255—2011

粮谷中玉米赤霉烯酮的快速测定方法超高效液相色谱法

1范围

本标准规定了粮食中玉米赤霉烯酮含量的免疫亲和净化超高效液相色谱测定方法。

本标准适用于玉米、小麦中玉米赤霉烯酮的测定。本标准方法检出限为10μg/kg。

2规范性引用文件

本标准中引用的文件对本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本标准。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3原理

试样中的玉米赤霉烯酮用乙腈-水提取后，提取液经免疫亲和柱净化、浓缩后，用配有荧光检测器的超高效液相色谱仪进行测定，外标法定量。

4试剂和材料

除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682中一级用水要求。

4.1甲醇(CH30H):HPLC级。

4.2乙腈(CH3CN):HPLC级。

4.3乙腈-水(9+1):取90mL乙腈加10mL水。

4.4氯化钠(NaCl)。

4.5玉米赤霉烯酮免疫亲和柱。

4.610%甲醇水：10mL甲醇加入到90mL水中。

4.7玉米赤霉烯酮(Zearalenone)标准品：纯度≥98%。

4.8玉米赤霉烯酮标准溶液：准确称取适量的玉米赤霉烯酮标准品，用乙腈配成浓度为0.1mg/mL的标准储备液，-20℃冰箱中避光保存。使用前用流动相稀释成适当浓度的标准工作液。

4.9玉米赤霉烯酮标准工作溶液：准确移取适量的玉米赤霉烯酮标准溶液，用乙腈-水-甲醇(46+46+8)配制玉米赤霉烯酮标准工作液，浓度为10μg/L、20μg/L、50μg/L、100μg/L、200μg/L,避光4

℃可保存7d。

4.10滤膜：0.22μm孔径，聚砜膜或相当者。

4.11玻璃试管：无荧光特性。

4.12玻璃注射器：10mL或20mL。

4.13玻璃纤维滤纸。

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DB22/T1255—2011

5仪器和设备

5.1天平：感量0.001g。

5.2超高效液相色谱仪：配有荧光检测器。

5.3高速万能粉碎机：转速10000r/min。

5.4高速均质器：转速大于10000r/min。

5.5试验筛：1mm孔径。

5.6空气压力泵。

5.7氮气吹干仪。

6分析步骤

6.1试样的制备与提取

将粮食样品用高速万能粉碎机(5.3)磨细，并通过试验筛(5.5),不要磨成粉末。

准确称取经过磨碎(粒度小于1mm)的试样50g(m,精确到0.01g)于250mL具塞锥形瓶中，加入5.0g氯化钠，5.0g聚乙二醇(4.2),加入100mL乙腈-水(9+1)(4.3)(V?)。混匀，转移至均质器中高速搅拌提取2min。静置，提取液经定量滤纸过滤于干净的烧杯中，准确移取10.0mL(V?,相当于试样5g)滤液并加入40.0mL(V?)水稀释，用玻璃纤维滤纸过滤1~2次，至滤液澄清，收集滤液于干净的容器中备用。

6.2免疫亲和柱净化

6.2.1将免疫亲和柱连接于20mL玻璃注射器下。

6.2.2准确移取10.0mL*(V4,相当于试样1g)上述提取滤液注入玻璃注射器中，将空气压力泵与玻璃