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2024年高中生物选择性必修3的12个疑难问题
选择性必修3的12个疑难问题
【问题1】大肠杆菌能生产糖蛋白吗?
【解答】干扰素有两种类型,一种是天然干扰素;另一种是重组干
扰素,是过基因工程技术生产的。研究表明,以基因工程和发酵
工程为手段,用大肠杆菌生产出来的干扰素是没有糖链的,化学本
质虽不是糖蛋白,但同样能够抑制病毒在细胞内的增殖,增强T、B
淋巴细胞的功能,加强巨噬细胞的吞噬作用和对癌细胞的杀伤作
用,也是干扰素。
真核细胞给蛋白加上糖链后,能够帮助蛋白折叠成正确的构
像,同时糖链有助于蛋白质的溶解,防止蛋白聚集沉淀,从而能
使糖蛋白分泌到细胞外。而在大肠杆菌表达的非糖基化蛋白常常
会聚集成不溶性的包涵体。一方面,包涵体中的蛋白是没有生物活
性的,需要过后续的溶解、纯化、复性等使其变成有生物活性的
蛋白⑴;另一方面,一些糖蛋白在去除糖链后尽管仍具有一定的生
物活性,但是易被蛋白酶降解。因此,真核细胞表达的干扰素需要
糖链来稳定结构、帮助溶解,并过转运系统分泌到细胞外,以
达到抗病毒、抗肿瘤的功效。
目前科学家发现某细菌里存在生产糖蛋白的基因簇,科学家用基
因工程方法将这套基因簇克隆至大肠杆菌内进行表达,使得大肠
杆菌也能够生产出相应的糖蛋白⑵。
【主要参考文献】
[1]夏启玉,肖苏生等,邓柳红.2008.包涵体蛋白的复性研究进展
[J].安徽农业科学,36(14):5801-5803
[2]王宏华,凌红丽.2008.乳糖诱导重组鸡Y干扰素基因在大肠
杆菌中的表达[J].中国动物检疫,25(6):25〜27
【问题2】蛋白质的分离纯化哪些方法?
【解答】蛋白质的分离方法除了教材介绍的凝胶色谱法之外,还
有以下几种方法:
1、粗提取方法有盐析沉淀法、等电点沉淀法、有机溶剂沉淀法⑴;
2、离心法有差速离心法、密度梯度离心法⑴;
3、精提取方法有离子交换层析、疏水相互作用层析、置换层析、
亲和层析、高效液相色谱、丙烯酥胺电泳、等电焦电泳⑵、
毛细管电泳;
4、此外,还有双水相萃取技术、浊点萃取法、反胶团萃取等方法
tn
迄今为止,我国还没有研究单一的蛋白质分离方式,不能利用合
理的措施提升其纯度与分离效果。还需要利用物理与化学方式对
其分离处理,在多种方法联合的情况下,确保蛋白质的分离纯化
符合规定。
【主要参考文献】
[1]张向阳主编.医学分子生物学[M].南京,江苏凤凰科学技术
出版社,2018.02:272-274.
⑵HeyJ,PoschA,CohenA,etal.Fractionofcomplexprotein
mixturesbyliquid—phaseisoelectricfocusing[J].Methodsin
MolecularBiology,2008,424:225—239.
【问题3】动物细胞培养的代数是细胞分裂次数吗
【解答】原代培养是指从机体组织分离后立即在体外进行首次培养,
使其在合适的条件下增殖到第一次传代阶段的培养阶段。这样培养的
细胞称为原代细胞。原代细胞与机体组织在形态结构和功能上很相似,
细胞移动活跃,细胞分裂不旺盛⑴。
传代培养是指当培养容器内培养的体外动物细胞增殖达到一定密度
后,因为生存空间和营养有限,细胞会停止分裂增殖,这时需要分离
到多个容器中继续培养,使细胞继续生存增殖,进行一次分离再培养
称之为传一代,这样培养的细胞称为传代细胞⑵。
综上所述,动物细胞培养的代数是指分瓶的次数,而不是分裂次数。
【主要参考文献】
[1]金征宇等[]主编.基因与纳米探针医学分子成像理论与实践
M.天津科学技术出版社,2017:807.
2]刘斌.细胞培养M].北京/西安:世界图书出版公
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