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2024年高中生物选择性必修3的12个疑难问题

选择性必修3的12个疑难问题

【问题1】大肠杆菌能生产糖蛋白吗？

【解答】干扰素有两种类型，一种是天然干扰素；另一种是重组干

扰素，是过基因工程技术生产的。研究表明，以基因工程和发酵

工程为手段，用大肠杆菌生产出来的干扰素是没有糖链的，化学本

质虽不是糖蛋白，但同样能够抑制病毒在细胞内的增殖，增强T、B

淋巴细胞的功能，加强巨噬细胞的吞噬作用和对癌细胞的杀伤作

用，也是干扰素。

真核细胞给蛋白加上糖链后，能够帮助蛋白折叠成正确的构

像，同时糖链有助于蛋白质的溶解，防止蛋白聚集沉淀，从而能

使糖蛋白分泌到细胞外。而在大肠杆菌表达的非糖基化蛋白常常

会聚集成不溶性的包涵体。一方面，包涵体中的蛋白是没有生物活

性的，需要过后续的溶解、纯化、复性等使其变成有生物活性的

蛋白⑴；另一方面，一些糖蛋白在去除糖链后尽管仍具有一定的生

物活性，但是易被蛋白酶降解。因此，真核细胞表达的干扰素需要

糖链来稳定结构、帮助溶解，并过转运系统分泌到细胞外，以

达到抗病毒、抗肿瘤的功效。

目前科学家发现某细菌里存在生产糖蛋白的基因簇，科学家用基

因工程方法将这套基因簇克隆至大肠杆菌内进行表达，使得大肠

杆菌也能够生产出相应的糖蛋白⑵。

【主要参考文献】

[1]夏启玉，肖苏生等，邓柳红.2008.包涵体蛋白的复性研究进展

[J].安徽农业科学，36(14)：5801-5803

[2]王宏华，凌红丽.2008.乳糖诱导重组鸡Y干扰素基因在大肠

杆菌中的表达[J].中国动物检疫，25(6)：25〜27

【问题2】蛋白质的分离纯化哪些方法？

【解答】蛋白质的分离方法除了教材介绍的凝胶色谱法之外，还

有以下几种方法：

1、粗提取方法有盐析沉淀法、等电点沉淀法、有机溶剂沉淀法⑴；

2、离心法有差速离心法、密度梯度离心法⑴；

3、精提取方法有离子交换层析、疏水相互作用层析、置换层析、

亲和层析、高效液相色谱、丙烯酥胺电泳、等电焦电泳⑵、

毛细管电泳；

4、此外，还有双水相萃取技术、浊点萃取法、反胶团萃取等方法

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迄今为止，我国还没有研究单一的蛋白质分离方式，不能利用合

理的措施提升其纯度与分离效果。还需要利用物理与化学方式对

其分离处理，在多种方法联合的情况下，确保蛋白质的分离纯化

符合规定。

【主要参考文献】

[1]张向阳主编.医学分子生物学[M].南京，江苏凤凰科学技术

出版社，2018.02：272-274.

⑵HeyJ,PoschA,CohenA,etal.Fractionofcomplexprotein

mixturesbyliquid—phaseisoelectricfocusing[J].Methodsin

MolecularBiology,2008,424：225—239.

【问题3】动物细胞培养的代数是细胞分裂次数吗

【解答】原代培养是指从机体组织分离后立即在体外进行首次培养，

使其在合适的条件下增殖到第一次传代阶段的培养阶段。这样培养的

细胞称为原代细胞。原代细胞与机体组织在形态结构和功能上很相似,

细胞移动活跃，细胞分裂不旺盛⑴。

传代培养是指当培养容器内培养的体外动物细胞增殖达到一定密度

后，因为生存空间和营养有限，细胞会停止分裂增殖，这时需要分离

到多个容器中继续培养，使细胞继续生存增殖，进行一次分离再培养

称之为传一代，这样培养的细胞称为传代细胞⑵。

综上所述，动物细胞培养的代数是指分瓶的次数，而不是分裂次数。

【主要参考文献】

［1］金征宇等［］主编.基因与纳米探针医学分子成像理论与实践

M.天津科学技术出版社，2017：807.

2］刘斌.细胞培养M］.北京/西安：世界图书出版公