真核基因表达的调控.pptVIP

HistoneCode染色质蛋白并非只是一种包装蛋白，而是在DNA和细胞其他组分之间构筑了一个动态的功能平台。转录活跃区域对核酸酶作用敏感度增加：在核小体区DNA受组蛋白掩盖的结构有变化，出现了对DNaseⅠ高敏感点(hypersensitivesite)。这种高敏感点常出现在转录基因的5′侧区(5′flankingregion)、3′末端或在基因上，多在调控蛋白结合位点的附近，该区域核小体的结构发生了变化，可能有利于调控蛋白结合而促进转录。用DNAaseI来鉴

别基因的活性在成体的红细胞中，成体?-球蛋白基因对DNAaseI的降解是高度敏感的，对胚胎?-球蛋白基因是部分敏感的(可能是由于扩散效应)，但对卵清蛋白基因是不敏感的。胚胎?-球蛋白基因成体?-球蛋白基因卵清蛋白基因DNA拓扑结构变化天然双链DNA的构象大多是负性超螺旋。当基因活跃转录时，RNA聚合酶转录方向前方DNA的构象是正性超螺旋，其后面的DNA为负性超螺旋。正性超螺旋会拆散核小体，有利于RNA聚合酶向前移动转录；而负性超螺旋则有利于核小体的再形成。（5）DNA碱基修饰变化：*真核DNA中的胞嘧啶约有5%被甲基化为5甲基胞嘧啶(5-methylcytidine,5-mC)，而活跃转录的DNA段落中胞嘧啶甲基化程度常较低。这种甲基化最常发生在某些基因5′侧区的CpG序列中，实验表明这段序列甲基化可使其后的基因不能转录。01DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变，从而阻碍转录因子与DNA特定部位的结合从而影响转录。DNA甲基化修饰途径存在于所有高等生物中并与基因表达调控密切相关。02DNA甲基化DNA甲基化是指在甲基化酶的作用下，将一个甲基添加在DNA分子的碱基上。DNA甲基化修饰决定基因表达的模式，即决定从亲代到子代可遗传的基因表达状态。DNA甲基化的部位通常在CpG岛的胞嘧啶DNMT1S-腺苷甲硫氨酸SAM胞嘧啶5-甲基胞嘧啶DNA甲基化抑制基因转录的机理*用组蛋白Hl与含CCGG序列的甲基化和非甲基化DNA实验后发现：甲基化达到一定程度时会发生从常规的B-DNA向Z-DNA的过渡。又由于Z-DNA结构收缩，螺旋加深，使许多蛋白质因子赖以结合的元件缩入大沟而不利于基因转录的起始。mCpG，即“CpG岛(CpG-richislands)”去甲基化(undermethylated)：基因表达增加甲基化(methylated)程度高，基因表达降低；在结构基因的调控区段，CpG二联核苷常常以成簇串联的形式排列。结构基因5’端附近富含CpG二联核苷的区域称为CpG岛(CpGislands)。CpG岛是CG二核苷酸含量大于50%的区域。CpG岛通常分布在基因的启动子区域。CpG岛的甲基化会稳定核小体之间的紧密结合而抑制基因的表达。DNA甲基化模式可以在DNA复制后被保持下来总体甲基化水平低局部甲基化水平高，即抑癌基因的甲基化水平高肿瘤细胞的甲基化特点基因组印记与DNA甲基化密切相关1956年Prader-Willi综合征(Prader-WilliSyndrome,PWS)，患者肥胖、矮小、中度智力低下。染色体核型分析表明为父源染色体15q11-13区段缺失。1968年Angelman综合征(AngelmanSyndrome，AS)，共济失调、智力低下和失语。母源染色体15q11-13区段缺失PWS和AS综合症表明，父亲和母亲的基因组在个体发育中有着不同的影响，这种现象称为基因组印迹(genomicimprinting)。有些基因的功能受到双亲基因组的影响，即来自父方和母方的等位基因在通过精子和卵子传递给子代时发生了修饰，打上了来源基因组的印记，使带有亲代印记的等位基因具有不同的表达特性。基因组印迹是两个亲本等位基因的差异性甲基化型造成了一个亲本等位基因的沉默，另一个亲本等位基因保持单等位基因活性(monoallelicactivity)。在PWS和AS患者中发现，微小染色体缺失集中的区域有成簇排列的富含CpG岛的基因表达调控元件，称为印迹中心(imprintingcenters,ICs)。在父源和母源染色体上，这些调控元件的CpG岛呈现甲基化型的明显差异。涉及到不同亲本来源的印迹基因的DNA甲基化型都是在生殖细胞成熟过程中建立的。印迹基因的DNA甲基化型在生殖细胞成熟过程中的建立原始性细胞（2n）合子（2n）配子（n）迄今已发现的印迹基因已有150余个，大多成簇排列，其中许多是疾病基因。虽多数印迹基因的作用机制尚不清楚，然而几乎都与DNA甲基化型的异常相关联。CoverLe