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遗传病的分析3
培养细胞的染色体制备在细胞的生长周期中,中期染色体的长短、大小、恒定性正适合我们对其进行分析、研究。因此利用人工的方法,使大部分分裂细胞处于中期而不向后期转化,并获得之,经处理,制片后观察分析。定义器材细胞株普通光学显微镜冰载玻片酒精灯25%胰旦白酶液1075MKCL2秋水仙素3固定液(冰醋酸/甲醇1:3)4Giemsa染液5试剂收集细胞前6h,培养细胞中加5ug/ml秋水仙素2滴,混匀后继续培养离心1800转/min×10min,弃上清,取沉淀再加入固定液1ml,并与原有的低渗液充分混匀,室温静置5min0.25%胰旦白酶液消化细胞,并收集细胞于离心管中加0.075MKCL低渗液4ml,充分打匀细胞,室温静置20min离心,弃上清,取沉淀010305020406操作操作加固定液5ml,轻轻打匀,室温静置30min离心,弃上清,取沉淀加少量固定液,制成染色体悬液取1-2滴染色体悬液,滴加在冰玻片上,迅速吹片,酒精灯下烤干玻片Giemsa染色5min,自来水冲洗,待干后,显微镜下观察光镜100倍下人染色体G带照片
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