血清总蛋白白蛋白测定SerumtotalproteinAlbum.pptVIP

准确性差，但因未加任何试剂和处理，可保留其生物活性且可回收全部蛋白质，故可用于较纯的酶和免疫球蛋白测定。01结合法在酸性环境下，蛋白质分子带正电，可与带负电的染料结合产生颜色而测定之。重复性好、灵敏度高，BCG法特异性不高。0203某些酸（如三氯醋酸、磺基水杨酸）能与蛋白质结合产生微细沉淀，测定悬浮液的浊度即可求得蛋白质的含量。简单、试剂易得，但影响因素太多。法血清总蛋白双缩脲测定法

原理：蛋白质中的肽键（-CONH-）在碱性环境中能与铜离子作用产生紫红色络合物。此反应和2个尿素分子缩合后生成的双缩脲（H2N-OC-NH-CO-NH2）在碱性环境中与铜离子作用产生紫红色络合物的反应相似，故称为双缩脲反应。颜色的深浅在一定浓度范围内与蛋白质含量成正比，经与同样处理的蛋白标准液比较，即可求得蛋白质含量郎伯-比耳定律：——溶液的吸光度与溶液浓度成正比

A1=lgI0/I=K1C1L1，

A2=lgI0/I=K2C2L2由于分析物质相同，处理一样，比色皿也相同，

故A1/A2=C1/C2，

则C1=×C2

A1A2双缩脲试剂（NaOH、硫酸铜、01酒石酸钾钠、碘化钾）02蛋白标准（60g/L）03二、主要试剂：加入物（ml）BS×2U×201血清//0.0502标准液/0.05/03双缩脲试剂3.03.03.004混匀，37℃，10分钟，540nm处比色，1cm光径比色杯，B管调零05三、操作步骤注：1.非严重黄疸、脂血及高脂血可以用蒸馏水调零，目的是检症血清不用做血清自身对照管。验各个试剂的好坏结果

Au

血清总蛋白（g/L）=——X60

As正常参考范围60-80g/L1临床意义2蛋白浓度升高

蛋白质合成增加：大多见于多发性3骨髓瘤患者

血浆浓缩，如急性失水、外伤性休4克、慢性肾上腺皮质功能减退。蛋白浓度降低

蛋白质合成障碍：肝功能严重受损→蛋白质合成减少

蛋白质丢失增加：严重烧伤、大出血、肾病综合征、溃疡性结肠炎

营养不良或消耗增加：营养失调、12345溶液或各种原因引起的水钠潴留。低蛋白饮食；患消耗性疾病

血浆稀释：如静脉注射过多低渗注意事项疸血清、严重溶血、某些试

剂（如葡萄糖、酚酞、溴磺酞

钠）对本法有明显干扰，可用

标本空白管来消除。脂血症混浊血清也会干扰比

色，先用丙酮抽脂后再做。01准确性高02重复性好03优点干扰少04试剂稳定05操作简便、快速06缺点灵敏度较低07手工和自动化都可，已被推荐08为测定血清总蛋白的参考方法。八、方法学评价白蛋白测定01白蛋白是血浆中含量最多的蛋白质。其测定方法主要有盐析法、电泳法、染料结合法、免疫法等。02盐析法

蛋白质分子表面因有水化膜的保护而稳定，如果加入大量中性盐则电荷被中和、水化膜被破坏，蛋白质分子因相互聚积而沉淀析出，此种现象称为盐析。球蛋白分子量较白蛋白大，相等重量的表面积要小，电荷和水化膜也少，故先被沉淀下来，而白蛋白仍留在溶液中，可用测定总蛋白的方法测定之。常用的中性盐有半饱和硫酸铵、23%硫酸钠、双硫酸（20.8%硫酸钠和7.0%亚硫酸钠溶液）01准确性差、操作烦琐，且不宜用自动生化分析，基本不用。02

血清总蛋白、白蛋白测定

（Serumtotalprotein、Albumintest）临床生物化学：

是研究机体健康和疾病的生物化学过程。测定体液或组织中的成份以提供对疾病的诊断、治疗和预防。

所用样品：

血液（血清/血浆）、尿液、脑脊液及体液输入标题测定方法：输入标题输入标题输入标题结合法、比浊法等。2凯氏定氮法、双缩脲法、酚试剂法、紫外分光光度法、染料143总蛋白测定

（一）、定氮法

历史悠久，它是根据蛋白质平均

含氮量16%来计算蛋白质浓度的。

结果准确，但方法复杂

标化血清

检验其他方法脲法

蛋白质中的肽键在碱性环境中能与铜离子作用产生紫红色络合物。此反应和2个尿素分子缩合后生成的双缩脲在碱性环境中与铜离子作用产生紫红色络合物的反应相似，故