TCVMA 176-2024 猫支气管败血波氏菌感染诊断技术规范.docx

ICS11.220

CCSB41

团 体 标 准

T/CVMA176—2024

猫支气管败血波氏菌感染诊断技术规范

TechnicalspecificationfordiagnosisoffelineBordetellabronchiseticainfection

2024-9-9发布 2024-9-9实施

中国兽医协会 发布

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前 言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中国农业科学院北京畜牧兽医研究所提出。

本文件由中国兽医协会归口。

本文件主要起草单位：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所、上海基灵生物科技有限公司、东莞博盛生物科技有限公司、北京市动物疫病预防控制中心、潍坊市动物疫病预防控制中心、上海市动物疫病预防控制中心、广州源博医药科技有限公司、天津市动物疫病预防控制中心、天津农垦康嘉生态养殖有限公司。

本文件主要起草人：梁瑞英、朱向东、梁琳、汤新明、丁家波、朱旭、王弋、刘昕、张启龙、贾婷、刘存、刘砚涵、孙燕、赖强、金红岩、赵洪进。

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猫支气管败血波氏菌感染诊断技术规范

范围

本文件规定了猫支气管败血波氏菌感染的流行病学、临床诊断、生化鉴定、以及PCR和荧光PCR实验室诊断的技术规范。

本文件适用于猫支气管败血波氏菌感染的诊断。

规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法

GB19489 实验室生物安全通用要求

GB/T27401 实验室质量控制规范动物检疫

GB/T40365 细菌无菌检测通则

NY/T541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范

术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

缩略语

下列缩略语适用于本文件。

Bb：支气管败血波氏菌（Bordetellabronchiseptica）

Ct：每个反应管内的荧光信号量达到设定阈值所经历的循环数（CycleThreshold）DHL：胆硫乳琼脂（DeoxychilateHydrogenSulfideLactoseAgar）PCR：聚合酶链式反应（PolymeraseChainReaction）

SDS：十二烷基硫酸钠（SodiumDodecylSulfate）

实时荧光PCR：实时荧光聚合酶链式反应（Real-timepolymerasechainreaction）

临床诊断

流行病学

患病猫接触感染支气管败血波氏菌的猫或患病猫使用过的用具。

患病猫发病前生活环境发生改变，比如寄养、更换住处、运输、进入多猫环境或去过医院。

过度拥挤、应激及卫生状况不良易诱发感染。

接触感染支气管败血波氏菌的犬，感染在犬和猫之间传播。

临床症状

患病猫出现发热、打喷嚏、眼睛分泌物增多、咳嗽等症状至少出现一种。

肺脏呼吸音增大、淋巴结肿大。

少数严重病例出现肺炎、呼吸困难及紫绀中的一种或者一种以上的症状。

结果判定

患病猫出现5.1和5.2中的任一项，可初步判定为支气管败血波氏菌感染疑似病例，需要进一步做实验室诊断。

样品采集、保存、运输及处理

样品采集

将无菌棉拭子用灭菌生理盐水充分浸润，采集眼、鼻和咽拭子样本或气管灌洗液。眼部应采集结膜囊内黏膜分泌物；深入鼻腔内部贴壁采集鼻腔黏膜分泌物；咽部拭子采集咽喉深处黏膜分泌物。将采集后拭子放入已装好细菌保存液的商品化样本收集管内（也可使用等渗盐溶液、组织培养液或磷酸盐缓冲液），折断手柄，随即密封即完成取样；气管灌洗液置于无菌管。编号并填写相应采样单，样品尽快送检，送检时添加冰袋保持低温。

样品保存、运输

用于细菌分离鉴定的样品置于4℃保存，应在24h之内送检。

用于核酸检测的样本，24h之内检测样本可置于4℃保存，24h内无法检测的样本于-70℃或以下保存，如无-70℃保存条件，可置于-20℃冰箱暂存。

样品处理

根据情况，向收集的拭子样品中，加入适量PBS缓冲液（PBS按附录B.1配制），制备悬液。

用无菌接种环，取适量重悬PBS或气管灌洗液直接划线接种血琼脂平皿和DHL琼脂平皿。