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蛋白质类药物的效价测定
职业教育医学生物技术专业教学资源库生化制剂或生物制剂因受外界因素影响(温度、湿度、时间、生产过程的各环节等)而易导致其生物活性降低或全部丧失而失去药理作用,所以除要测定其含量外,还要测定其生物学活性以确定其是否具有体内或体外作用。多肽、蛋白质类药物的效价测定较多地采用生物检定法。《中国药典》(220年版)规定了胰岛素、肝素、绒毛膜促性腺激素等药品的生物检定法,规定了各种蛋白质类抗生素的微生物效价测定法,还收载了菌苗、疫苗、抗毒素、类毒素等的效价测定法。
职业教育医学生物技术专业教学资源库对蛋白质类激素的效价测定多根据该药物的药理作用设计动物试验。如胰岛素的效价测定《中国药典》(2020年版)采用小鼠血糖法,比较胰岛素标准品与供试品引起小鼠血糖下降的剂量与反应的两条平行直线的关系,间接测定反应剂量的方法,并按双交叉设计,由测定每组各动物给药后的血糖值,再照剂量反应平行线计算供试品的效价及实验误差。(1)蛋白质类激素的效价测定法
职业教育医学生物技术专业教学资源库绒促性素的效价测定采用小鼠子宫增重法,生长激素的效价测定采用去垂体大鼠体重法等。(1)蛋白质类激素的效价测定法
职业教育医学生物技术专业教学资源库多数抗毒素及免疫血清可采用动物中和实验法,即将供试品与标准品抗毒素分别与试验毒素结合后,通过动物实验进行对比试验,由标准品效价求出其效价单位。(2)免疫血清及毒素的效价测定法
职业教育医学生物技术专业教学资源库人乙型肝炎免疫球蛋白可采用放射免疫测定法,利用供试品中的乙肝表面抗体与包被球上的乙肝表面抗原结合,再与1-乙肝表面抗原结合,形成免疫复合物,样品中乙肝表面抗体含量与1-乙肝表面抗原结合量成正相关函数,在一定浓度范围内,将供试品与标准品测定结果相比较,通过回归分析,计算出样品中乙肝表面抗体的含量。(3)人免疫球蛋白及凝血因子的效价测定法
职业教育医学生物技术专业教学资源库人破伤风免疫球蛋白可利用小鼠中和试验法,利用该免疫球蛋白能中和相应毒素的作用,将供试品与标准品分别与试验毒素结合后,通过动物进行对比试验,由标准品效价求出供试品效价。(3)人免疫球蛋白及凝血因子的效价测定法
职业教育医学生物技术专业教学资源库凝血因子多采用凝固时法,即将供试品和标准品分别与缺乏凝血因子的基质血浆混合,通过激活的部分凝血活酶、钙离子以及凝血因子参与的凝血反应测定基质血浆的凝固时间,根据标准品浓度与相应凝固时间的标准曲线,计算供试品凝血因子的效价。(3)人免疫球蛋白及凝血因子的效价测定法
职业教育医学生物技术专业教学资源库②根据干扰素可保护人羊膜细胞(WISH)免受水泡性口炎病毒(VSV)破坏的作用,用结晶紫对存活的WISH细胞染色,于波长570nm处测定其吸光度,可得到干扰素对WISH细胞的保护效应曲线,以此测定干扰素的效价。(4)细胞因子的效价测定法
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