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原理测定方法参考值临床意义方法学评价注意事项小结血清胆固醇的测定(氧化酶法)AssaysforSerumCholesterol一、原理血清中总胆固醇(TC)包括游离胆固醇(FC)和胆固醇酯(CE)两部分。血清中胆固醇酯可被胆固醇酯酶水解为游离胆固醇和游离脂肪酸(FFA),胆固醇在胆固醇氧化酶的氧化作用下生成胆甾烯酮和过氧化氢,过氧化氢在4-氨基安替比林和酚存在时,经过氧化物酶催化,反应生成苯醌亚胺非那腙的红色醌类化合物。(4-AAP:4-氨基氨替比林)(POD:过氧化物酶)胆固醇酯+H2O胆固醇+脂肪酸(CE胆固醇酯酶)H2O2+4-AAP+酚H2O+醌亚胺(红色醌类化合物)胆固醇+O24-胆甾+3-烯酮+H2O2(COD:胆固醇氧化酶)红色醌类化合物生成量与样品中胆固醇含量成正比,与经过同样处理的胆固醇校准液进行比较,即可计算出样品中胆固醇的含量。R1:胆固醇酯酶(CE)≥0.4KU/L胆固醇氧化酶(COD)≥0.2KU/L过氧化物酶(POD)≥5.0KU/L试剂01R2:酚20.0mmol/L胆酸钠2.0mmol/L4-氨基安替比林(4-APP)0.5mmol/L02二、测定方法二、测定方法
2.加样各管充分混匀置37水浴10分钟后,室温冷却测定试剂蒸样品管(U)标准管(S)空白管(B)血清(ml)0.02——标准液(ml)—0.02—蒸馏水(ml)——0.02工作试剂(ml)2.002.002.00分光光度计测定方法:波长505nm,以空白管调零,测定标准管和样品管吸光度值,按公式计算测定结果。计算公式:Glu含量(mmol/L)=×Cs其中:Cs=5.22mmol/L正常:﹤5.17mmol/L01轻度增高:5.17~6.47mmol/L02参考值:0102血清胆固醇升高:动脉粥样硬化、肾病综合征、肝细胞性黄疸、阻塞性黄疸及重症糖尿病等。血清总胆固醇是是指血液中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。总胆固醇包括游离胆固醇和胆固醇酯,肝脏是合成和贮存的主要器官。胆固醇是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸及维生素D等生理活性物质的重要原料,也是构成细胞膜的主要成分,其血清浓度可作为脂代谢的指标。指临床上将血总胆固醇增高称为高胆固醇血症。四、临床意义:血清总胆固醇水平分为三级:合适范围5.72mmol/L(220mg/dl)。边缘升高5.23-5.69mmol/L(201-219mg/dl);过高值5.72mmol/L(220mg/dl)。血清总胆固醇水平增高是导致冠心病的独立危险因素。血清总胆固醇越高,发生动脉粥样硬化的风险越大,时间也越早。血清总胆固醇每降低1%,发生冠心病的危险性可减少2%。但另一方面,血清总胆固醇降到多低合适?目前认为,将血清总胆固醇保持在2.1-5.2mmol/L(90-200mg/dl)范围内较为合适。对已有动脉粥样硬化或冠心病者,应将胆固醇降至180mg/dl以下。血清胆固醇降低:恶性贫血、溶血性贫血、甲状腺机能亢进、急性感染,营养不良等。甲亢患者在发病期间其血清胆固醇水平往往明显低于正常值,或者属于临界值范围;当通过一段时间的有效治疗后,血清胆固醇又会逐渐回复至正常水平。其降低的机理是,甲亢导致甲状腺激素大量分泌,而甲状腺激素对脂肪的合成与分解有很强的促进作用,但是分解更明显。由此可知,当机体发生甲亢时,体内的胆固醇合成与分解排泄同时都有所增加,但分解排泄比合成更明显,而同时,甲状腺激素还通过增强腺苷环化酶-cAMP系统的影响和致敏组织对儿茶酚胺、生长素等脂肪动员激素的作用而促进脂肪溶解。所以导致血清中的胆固醇会有所降低。010203040506线性范围:0.05~12.9mmol/L,r≥
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