DB1310T 345-2024平菇液体菌种制备技术规范.docxVIP

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0B1310

廊坊市地方标准

DB1310/T345—2024

平菇液体菌种制备技术规范

2024-06-28发布2024-07-28实施

廊坊市市场监督管理局发布

I

DB1310/T345—2024

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件由廊坊市农业农村局提出。

本文件起草单位：廊坊市森淼春食用菌有限公司、廊坊师范学院、献县农业农村局、廊坊市自然资源与规划局、廊坊市农业农村局。

本文件主要起草人：周志国、陈文杰、解春艳、王艳、侯桂森、任思竹、付强、闫训友、史振霞、张瑞青、杜伟娜、王素霞、乔丽秀、李春叶。

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平菇液体菌种制备技术规范

1范围

本文件规定了平菇液体菌种的基本要求、生产技术和生产档案等要求。

本文件适用于平菇液体菌种的制备。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB150压力容器

GB5749生活饮用水卫生标准

GB19172平菇菌种

GB50073洁净厂房设计规范

GB/T4789.28食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求

GB/T12728食用菌术语

NY/T528食用菌菌种生产技术规程

3术语和定义

GB/T12728界定的以及下列术语和定义适用于本文件。

3.1

液体菌种

在生物发酵罐中通过深层培养(液体发酵)技术生产的液体形态的食用菌菌种。

3.2

母种

经各种方法选育得到的具有结实性的菌丝体纯培养物及其继代培养物，以玻璃试管为培养容器和单位，也称一级种、试管种。

3.3

液体菌种菌龄

菌种接入培养基开始计算的液体菌种培养时间。

3.4

发酵罐空消

对尚未加水投料的空发酵罐进行高压灭菌。

3.5

发酵罐实消

指对投料后的发酵罐进行高压蒸汽灭菌。

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3.6

通气量

单位时间通入发酵罐中无菌空气体积与发酵罐体积的比值。

3.7

菌种活力

菌种的生长、繁殖能力。

4基本要求

4.1人员要求

工作人员应该保持个人卫生，进液体菌种发酵车间须穿戴经灭菌处理的工作服、口罩、鞋、帽。

4.2场所要求

生产场所符合NY/T528的环境卫生要求，场地开阔、路面硬化、卫生清洁。生产用水应符合GB5749要求。

4.3厂房及设施要求

厂房设计应符合NY/T528要求。洁净车间应设有多功能实验室、菌种保藏室、无菌接种室、摇瓶室、发酵罐室，设计符合GB50073要求。

4.4生产设备要求

具有磅秤、量筒、量杯、天平、高压蒸汽灭菌锅、发酵罐、液体菌种接种器、超净工作台、调温设备、恒温培养箱、恒温摇床或磁力搅拌器、冰箱、显微镜等及其它常规用具。压力容器应每年经政府有关部门检验合格，符合GB150要求。具有备用电源。

5生产技术

5.1工艺流程

工艺流程步骤如图1所示。

发西擅空消

发西擅空消

发酵罐培养

实消

发酵罐培养基配制备

摇瓶培养基配制

成品液体菌种

母钟斜面制备

三角瓶培养

发酵击罐煮罐

检验检测

灭菌

接种

图1工艺流程步骤

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5.2母种活化

母种活化配方及操作流程应符合NY/T528要求。活化后母种质量应符合GB19172要求。

5.3摇瓶液体菌种生产

5.3.1容器

使用无色或近无色专用玻璃三角瓶做摇瓶，使用硅胶塞或专用封口透气膜进行封口。

5.3.2培养基配方

生产用水应符合GB5749要求，培养基质应符合NY/T528要求，玉米粉过30目筛。其中，培养基配方根据成分不同，分为配方1和配方2:

——配方1:葡萄糖20g,蛋白胨5g,酵母膏2g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁0.5g,维生素B?10mg,水1L,pH6.0～6.5;

——配方2:玉米粉10g,葡萄糖20g,酵母膏5g,牛肉膏2g,磷酸二氢钾2g,硫酸镁1g,维生素B?10mg,水1L,pH6.0～6.5。

5.3.3培养基配制

按液体培养基