4、一种基于Wnt-5ARor2信号通路的软骨细胞增殖方法.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号CN112680409A

(43)申请公布日2021.04.20

(21)申请号202011554925.2

(22)申请日2020.12.24

(71)申请人肌因美生物基因工程（上海）有限公

司

地址201306上海市浦东新区中国(上海)

自由贸易试验区临港新片区环湖西二

路888号C楼

(72)发明人杜剑波

(74)专利代理机构北京纪凯知识产权代理有限

公司11245

代理人陆惠中王永伟

(51)Int.Cl.

C12N5/077(2010.01)

A61L27/38(2006.01)

权利要求书1页说明书5页附图2页

(54)发明名称

一种基于Wnt-5A/Ror2信号通路用于美容细

胞再生的制剂

(57)摘要

本发明提供了一种基于Wnt‑5A/Ror2信号通

路用于美容细胞再生的制剂和培养基，能够在提

高软骨细胞增殖能力及再生的同时改善与维持

软骨细胞表型，提高软骨细胞体内应用的稳定性

与安全性。本发明的细胞培养制剂可以降低基础

培养基中通常的血清的使用含量，并显著促进软

骨细胞的培养及再生，解决了美容软骨细胞培养

使用的培养基成分复杂，培养困难，生长速度慢

的问题。本发明的细胞增殖制剂是通过抑制Wnt‑

5A/Ror2信号通路调控IL‑1β诱导软骨细胞的增

殖及再生，因此，本发明的制剂可以作为一种信

A号因子用于软骨细胞的增殖及再生等，培养的细

9胞可以作为美容原料进一步应用于美容软骨损

0

4

0伤修复等。本发明提供的方法具有操作简单、方

8

6

2便的特点，适合推广应用。

1

1

N

C

CN112680409A权利要求书1/1页

1.一种用于美容软骨细胞培养及再生的培养基，包括基础培养基、浓度5‑20％胎牛血

清和细胞增殖制剂，其特征在于，所述细胞增殖制剂为芦荟大黄素。

2.如权利要求1所述的用于美容软骨细胞培养及再生的培养基，其特征在于，所述芦荟

大黄素的浓度为20‑120μmol/L，优选40、60或80μmol/L。

3.如权利要求2所述的用于美容软骨细胞培养及再生的培养基，其特征在于，所述细胞

增殖制剂进一步包括咖啡酸。

4.如权利要求3所述的用于美容软骨细胞培养及再生的培养基，其特征在于，所述咖啡

酸的浓度为20‑120μmol/L，优选40、60或80μmol/L。

5.如权利要求4所述的用于美容软骨细胞培养及再生的培养基，其特征在于，所述基础

培养基选自DMEM或者DF12。

6.一种用于美容软骨细胞培养及再生的细胞增殖制剂，其特征在于，所述增殖制剂包

括芦荟大黄素和咖啡酸。

7.一种美容软骨细胞增殖及再生的方法，其特征在于，包括：

(1)采用酶消化法从供体获取软骨细胞；

(2)将所述软骨细胞在权利要求1‑5任一权利要求所述的培养基中培养；

(3)对培养增殖的美容软骨细胞进行纯化，保存备用。

8.芦荟大黄素和/或咖啡酸在制备用于美容软骨细胞培养及再生的细胞增殖制剂中的

用途。

9.权利要求1‑5任一权利要求所述的培养基和/或权利要求6所述的细胞增殖制剂作为

信号因子在美容软骨细胞培养及再生中的应用，其特征在于，所述信号因子通过抑制Wnt‑

5A/Ror2信号通路调控IL‑1β诱导软骨细胞的增殖及再生。

10.一种美容软骨细胞，其特征在于，所述美容软骨细胞采用权利要求1‑5任一权利要

求所述的培养基和/或权利要求6所述的细胞增殖制剂培养获得。