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非复制型猫mRNA疫苗UTR分子构建与筛选研究

目录

非复制型猫mRNA疫苗UTR分子构建与筛选研究（1）．．．．．．．．．．．．．．．4

一、内容简述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

1.2文献综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

1.3研究目标和问题陈述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

二、材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

2.1实验材料准备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

2.1.1主要试剂的选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

2.1.2样品处理技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

2.2分子构建策略．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

2.2.1非复制型mRNA的设计原则．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

2.2.2UTR序列的选取与优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

2.3筛选流程建立．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

2.3.1初步筛选标准设定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

2.3.2高通量筛选方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

三、结果与讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

3.1构建效果评估．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

3.1.1表达效率分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

3.1.2稳定性测试．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

3.2筛选结果解读．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

3.2.1最佳UTR组合确定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

3.2.2对比不同条件下的表现差异．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

四、结论与展望．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

4.1主要发现总结．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32

4.2研究局限性与挑战．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

4.3未来工作方向．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

非复制型猫mRNA疫苗UTR分子构建与筛选研究（2）．．．．．．．．．．．．．．35

研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

1.1猫mRNA疫苗的研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

1.2非复制型猫mRNA疫苗的优势．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

1.3UTR分子在mRNA疫苗中的应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39

材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40

2.1研究材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41

2.1.1猫源mRNA模板．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42

2.1.2UTR分子序列库．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43

2.1.3表达载体．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44

2.1.4实验动物．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．