动物实验设计与结果分析.pptVIP

5．实验处理方法和指标的选定*实验处理包括处理因素、处理时间、次数、强度（剂量）、途径等，这些都要在实验方案中确定下来。1动物实验指标一般包括两部分：试验期间活体观察指标和实验结束处死解剖观察取材测试指标。2试验期间活体观察指标包括一般观察、无创伤性测定指标和创伤性测定指标。一般观察包括动物的精神、行为、营养、被毛、摄食情况、大小便及口鼻耳阴部分泌物等,一般无需惊动动物；无创伤性测定指标包括心电图、血压、呼吸、自主活动等测试，有的需要无线遥控设备。无线遥控无创伤观察测试可避免干扰动物，减少动物应激，因而测试数据准确、可靠。创伤性测定指标包括手术、取血取材等，对动物长期观察忽多忽少产生影响。实验设计时要考虑研究团队有无技术基础和实验条件，以及评估创伤性试验对动物试验的影响。3实验结束处死解剖观察取材测试涉及到麻醉、取全血/血浆/血清、脏器称重、病理组织取材及固定等一系列步骤，可依据实验目的和检测指标选择部分或全部进行。4由于动物实验几乎涉及到基础和临床各个学科，不同的研究有不同的目的和要求，所用的试验方法、仪器设备和指标也各不相同，但无论选择何种实验方法，均应力求做到以下几点：(1)可靠性：即方法切实可行、指标稳定可靠，是受大家公认的方法，也称经典方法。(2)客观性：尽量选用仪器设备检测，避免主观描述；能定量的就不要选用定性指标。(3)先进性：当今重大科研成果的出现几乎都利用了先进的仪器设备、技术和检测指标，将整体动物实验与细胞水平、分子水平检测指标结合起来进行综合分析。因此充分利用本单位或其它单位的先进仪器设备为自己的课题服务对于提升课题的级别，提高试验质量有着重要意义。实验周期的确定一个动物实验周期要持续多长时间取决于实验目的和是否能从动物实验中得到所需要的试验结果。例如，用兔制作动脉粥样硬化模型，饲喂高脂、高胆固醇饲料后一个半月，兔的主动脉上可产生肉眼可见粥样斑块，表明造模成功。如果此时用药物干预治疗，还需要再增加4周以上治疗时间，总的实验周期在3个月左右。在实验设计中需参照文献报道或根据相关实验室的经验，或通过预试验摸索。（三）药物剂量的设计和换算*中医药实验研究中很大一部分是药效学和毒理学研究，实验研究结果的好坏与剂量设计有很大的关系。一个疗效好的药物剂量过小可能在实验中显示不出药效，剂量过大可能暴露其毒性作用。因此准确的剂量设计对试验的成功起着重要的作用。如果研究的是一种新药，没有临床资料和动物试验资料，那么只能通过设置多个剂量进行预试验摸索。如果有人的临床用药剂量或动物实验参考剂量，那么可转换成不同动物的等效剂量。研究证明药物的等效剂量不是与动物的体重成正比的，而是与单位体重体表面积成正比的，因此小动物的等效剂量往往是人的数倍。种属小鼠b（0.02）大鼠b(0.150)地鼠b(0.080)豚鼠b(0.4)兔b(1.8)比格犬b(10.0)猕猴b(3.0)成人b(60.0)小鼠a1.000.500.600.3750.250.1500.250.081大鼠a2.001.001.200.750.500.300.500.162地鼠a1.671.201.000.6250.4170.250.4170.135豚鼠a2.671.331.601.000.6670.400.6670.216兔a4.002.002.401.501.000.601.000.324比格犬a6.673.334.002.501.671.001.670.541猕猴a4.002.002.401.501.000.601.000.324人a12.336.177.404.633.081.853.081.00注：引自黄继汉等,药理试验中动物间和动物与人间的等效剂量换算.中国临床药理学与治疗学.2004,9(9):1069-1072。括号中数值单位为kg。标准体重动物由动物a到动物b的mg/kg换算系数中医在长期的临床实践中，对一般常用中药的用量积累了丰富的经验，规定了每味中药的临床用量。在实验研究中，可将人的临床用量换算成动物的用量。《中国药典》2010年版规定中药雄黄的人临床用量为，换算成小鼠的用量是多少？答：按人临床最高用量0.1g、体重60kg计算，得1.7mg/kg，换算成小鼠用量时查表1人a行小鼠b列的换算系数为12.33，故小鼠的等效剂量是1.7mg*12.33=21.0mg/kg。已知某药20g小鼠用4mg/kg，换算成8kg比格犬的用药剂量？答：查表1小鼠a行，比格犬b列的换算系数为0.15，故比格犬的剂量=4×0.15=0.60mg/kg