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西伯利亚杏花芽酵母cDNA文库构建及其质量评价研究

目录

西伯利亚杏花芽酵母cDNA文库构建及其质量评价研究（1）．．．．．．．．4

内容概要．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.1研究背景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.1.1西伯利亚杏的生物学特性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

1.1.2杏花芽酵母在生物技术中的应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

1.2国内外研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

1.2.1cDNA文库构建技术概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

1.2.2西伯利亚杏相关研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

1.3研究目的与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

2.1材料来源．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

2.1.1西伯利亚杏花芽样本采集．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

2.1.2实验试剂与仪器．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

2.2cDNA文库构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

2.2.1总RNA提取．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

2.2.2第一链cDNA合成．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

2.2.3双链cDNA合成．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

2.2.4连接接头与插入载体．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

2.2.5转化宿主菌．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

2.2.6cDNA文库的扩增与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

2.3cDNA文库质量评价．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

2.3.1文库克隆数与克隆密度测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

2.3.2文库测序与序列分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

2.3.3文库的多样性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

结果与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

3.1cDNA文库构建结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

3.1.1文库克隆数量与分布．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32

3.1.2文库测序与质控结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

3.2文库质量评价．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

3.2.1文库克隆数与克隆密度的统计分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36

3.2.2文库测序结果分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

3.2.3文库多样性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38

西伯利亚杏花芽酵母cDNA文库构建及其质量评价研究（2）．．．．．．．39

一、内容综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39

1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40

1.2研究目的与内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40

1.3研究方法与技术路线．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41

二、材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．