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*长江大学生科院生物工程系*在天冬酰胺酶发酵中,前期是好氧培养,后期转为厌氧培养,酶活可大大提高。所以掌握由好氧转为厌氧的时机颇为关键。据实验研究,当溶氧下降到45%空气饱和度时由好氧切换到厌氧培养,并适当补充营养可提高酶活6倍。而异亮氨酸、赖氨酸、苏氨酸和天冬氨酸,供氧充足可得最高产量,但供氧受限,产量受影响并不明显。*氧的满足程度氨基酸的相对产量返回**四、发酵过程中溶解氧的变化在正常发酵条件下,每种产物发酵的溶氧变化都有自己的规律。*长江大学生科院生物工程系*谷氨酸发酵的溶氧低峰约在6~20h,低峰出现的时间和低峰溶氧随菌种、工艺条件和设备供氧能力不同而异。在谷氨酸发酵前期,产生菌大量繁殖,需氧量不断增加。此时的需氧量超过供氧量,使溶氧明显下降,出现一个低峰,发酵液中的菌浓同时出现一个高峰。过了生长阶段,需氧量有所减少,溶氧经过一段时间的平稳阶段后,就开始形成产物,溶氧也不断上升。*长江大学生科院生物工程系*污染好气性杂菌,大量的溶氧被消耗掉,可能使溶氧在较短时间内下降到零附近;菌体代谢发生异常现象,需氧要求增加,使溶氧下降;某些设备或工艺控制发生故障或变化,搅拌功率变小或搅拌速度变慢,影响供氧能力,使溶氧降低。消泡剂因自动加油器失灵或人为加量太多,也会引起溶氧迅速下降。在发酵过程中,有时出现溶氧明显降低或明显升高的异常变化,常见的是溶氧下降。引起溶氧异常下降,可能有下列几种原因:*长江大学生科院生物工程系*引起溶氧异常升高的原因返回在供氧条件没有发生变化的情况下,主要是耗氧出现改变,如菌体代谢出现异常,耗氧能力下降,使溶氧上升。特别是污染烈性噬菌体,影响最为明显,产生菌尚未裂解前,呼吸已受到抑制,溶氧有可能上升,直到菌体破裂后,完全失去呼吸能力,溶氧就直线上升。由上可知,从发酵液中的溶氧变化,就可以了解微生物生长代谢是否正常,工艺控制是否合理,设备供氧能力是否充足等问题,帮助我们查找发酵不正常的原因和控制好发酵生产。*长江大学生科院生物工程系*五、反应器中氧的传递(一)发酵液中氧的传递方程CCiPPi气膜液膜N:传氧速率kmol/m2.hkg:气膜传质系数kmol/m2.h.atmkL:液膜传质系数m/h*长江大学生科院生物工程系*:体积传氧速率kmol/m3.h:以(C*-C)为推动力的体积溶氧系数h-1kL:以氧浓度为推动力的总传递系数(m/h)C*=P·H,与气相中氧分压相平衡的液体中氧的浓度再令:单位体积的液体中所具有的氧的传递面积为a(m2/m3)*长江大学生科院生物工程系*(二)供氧的调节C有一定的工艺要求,所以可以通过和C*来调节调节kLa是最常用的方法,kLa反映了设备的供氧能力。45升1吨10吨搅拌速度250r/min120120供氧速率7.610.720.1发酵常用的设备为:摇瓶、发酵罐*长江大学生科院生物工程系*1、影响摇瓶kLa的因素为装液量和摇瓶机的种类摇瓶机往复,频率80-120分/次,振幅8cm旋转,偏心距25、12,转速250r/min*长江大学生科院生物工程系*装液量,一般取1/10左右:250ml15-25ml500ml30-50ml750ml80ml例:500ml摇瓶中生产蛋白酶,考察装液量对酶活的影响装液量30ml60ml90ml120ml酶活力71373425392*长江大学生科院生物工程系*2、影响发酵罐中kLa的因素(1)设备参数:发酵罐的形状结构、搅拌器(直径d)、挡板、空气分布器等。(2)操作条件:通气量Q、搅拌转速N、搅拌功率PG、罐压、发酵液体积V、液柱高度HL等。(3)发酵液的性质:密度、黏度、表面张力和扩散系数等。(4)氧载体*长江大学生科院生物工程系*例某一产品的发酵dNPG/VC产量450180
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