DB12T 199-2004 以大豆为原料的酱油等发酵产品中转基因成分的定性检测方法.docx

ICS65.020.01

B04

备案号：

天津市地方标准

DB12/T199—2004

以大豆为原料的酱油等发酵产品中转基因成分的定性检测方法

Protocolofthequalitativedetectionfortransgeniccomponentinfermentedproducts(soysauceetc)producedfromsoybeans

2004-07-28发布2004-07-28实施

天津市质量技术监督局发布

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DB12/T199-2004

前言

本标准在制定用于检测以大豆为原料的酱油等发酵制品中的内源基因和外源基因的引物序列时，采用了欧盟推荐的检测方法，项目编号为EU-ProjectSMT4-CT96-2072,方法编号为Brodmann,P.97c和Brodmann,P.97d,检测CaMV35S启动子的引物序列(195bp)和NOS终止子的引物序列(180bp)。

本标准由未津市农产品质量监督检验测试中心提出。

本标准起草单位：天津市农产品质量监督检验测试中心、中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局。

本标准主要起草人：金红、赵昕、王永、程奕、郑贵忠。

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DB12/T199—2004

以大豆为原料的酱油等发酵产品中转基因成分的定性检测方法

1范围

本标准规定了酱油等液态发酵制品和豆腐乳等固态发酵制品中转基因成分的定性聚合酶链式反应(简称为PCR)检测方法。

本标准适用于以转基因抗草甘膦大豆、转基因抗草丁膦大豆和转基因高油酸大豆为原料的发酵制品中转基因成分的定性PCR检测。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

SN/T1193基因检验实验室技术要求

SN/T1194植物及其产品转基因成分检测的抽样和制样方法

SN/T1204植物及其加工产品中转基因成分实时荧光PCR定性检验方法

3术语、定义和缩略语

下列术语、定义和缩略语适用于本标准。

3.1转基因成分transgeniccomponent

物种本身不具有的、而是来源于其他物种的功能基因序列。

3.2聚合酶链式反应polymerasechainreaction(PCR)

模板基因序列先经高温变性成为单链，在DNA聚合酶作用和适宜的反应条件下，根据模板序列设计的两条引物分别与模板DNA两条链上相应的一段互补序列发生退火而相互结合，接着在DNA聚合酶的作用下以四种脱氧核糖核酸(dNTPs)为底物，使引物得以延伸，然后不断重复变性、退火和延伸这一循环，使欲扩增的基因片段以几何倍数扩增。

3.3定性检测qualitativedetection

对样品中转基因成分进行检测，以判定该样品是否为转基因产品。

3.4缩略语

3.4.1GMO:geneticallymodifiedorganism,转基因生物。

3.4.2PCR:polymerasechainreaction,聚合酶链式反应。

3.4.3DNA:deoxyribonucleicacid,脱氧核糖核酸。

3.4.4dNTPs:deoxyribonucleosidetriphosphate,脱氧核甘三磷酸。

3.4.5Lectin:植物凝集素基因，为大豆本身含有的内源基因。

3.4.6CaMV35S:35Spromoterfromcauliflowermosaicvirus,花椰菜花叶病毒35S启动子。

3.4.7NOS:TerminatorofnopalinesynthasegenefromAagrobacteriumtumefaciens,来源于农杆菌的胭脂碱合成酶基因终止子。

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DB12/T199—2004

3.4.8CP4EPSPs:5-enolpyruvylshimate-3-phosphate