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ICS65.020.20

CCSB23

15

内蒙古自治区地方标准

DB15/T3699—2024

马铃薯种质资源离体培养及保存技术规程

Technicalcodeofpracticefortissuecultureandpreservationof

potatogermplasmresources

2024-10-25发布2024-11-25实施

内蒙古自治区市场监督管理局发布

DB15/T3699—2024

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起

草。

本文件由内蒙古自治区农牧厅提出。

本文件由内蒙古自治区农业标准化技术委员会(SAM/TC20)归口。

本文件起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院。

本文件主要起草人：曹春梅、逯春杏、王晓娇、许飞、韩艺、张翠玲、胡嘉鑫。

I

DB15/T3699—2024

马铃薯种质资源离体培养及保存技术规程

1范围

本文件规定了马铃薯种质资源离体培养技术规程及保存的茎尖剥离（脱毒）材料的选取、脱毒与培养、

试管苗保存、试管薯诱导等技术要求。

本文件适用于马铃薯种质资源离体培养及保存。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文

件。

NY/T401脱毒马铃薯种薯（苗）病毒检测技术规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

茎尖剥离apicalstripping

应用茎尖分生组织培养技术，选取马铃薯芽顶端部分（直径0.1mm～0.3mm），带有1～2个叶原基的

茎尖分生组织，移植到诱导培养基中培养。

离体培养isolatedculture

选取马铃薯茎尖、茎段或其他离体组织通过无菌操作接种在特定的培养基上，在人工控制条件下进行

培养，已获得的完整植株可保持其体内所含遗传物质的完整性，从而达到保存目的的方法。

4茎尖剥离（脱毒）材料的选取

选取无类病毒(PSTVd)、健壮且具备马铃薯品种（系）典型农艺性状植株的顶芽、腋芽或健康块茎的茎

尖作为材料。

5脱毒与培养

脱毒材料的预处理

收获脱毒材料，将块茎放置在温室或培养箱内进行催芽处理。待芽萌发2cm时，在温度35℃~37℃

进行高温钝化处理15d，光照/黑暗12h，光照强度2000Lx。

1

DB15/T3699—2024

培养基的制备

选用MS+0.5mg/L萘乙酸+0.1mg/L6-苄氨基腺嘌呤或MS+0.2mg/L萘乙酸配方配制培养基，培养基

pH值调至5.8~6.0。分装后在121℃条件下，灭菌25min~30min，待培养基冷却凝固，观测24h，确保无

菌后备用。

脱毒材料的消毒处理

5.3.1取材

选取经处理的马铃薯块茎上顶芽或侧芽组织2cm左右，或选取经处理的马铃薯植株顶芽、腋芽2cm左

右作为脱毒材料。

5.3.2清洗

将选取的