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葡萄球菌和链球菌的微生物学检查

姓名：李超班级：动科1202学号

摘要：掌握致病性葡萄球菌和链球菌的微生物学检查方法，了解两种

细菌的形态、排列、生化特征以及主要的鉴别要点。纯培养，链球菌

对营养要求严格，不能在普通培养基上生长，但可以在血平板上生长；

葡萄球菌在普通培养基上就能生长。革兰氏染色法，将革兰氏阳性菌

（金黄色葡萄球菌与链球菌）染成红色。触媒反应，葡萄球菌与过氧

化氢接触，产生气泡。甘露醇发酵实验，葡萄球菌中只有金黄色葡萄

球菌呈阳性，其他葡萄球菌链球菌为阴性。凝固酶反应，葡萄球菌中

只有金黄色葡萄球菌呈凝固酶阳性，其他葡萄球菌链球菌为凝固酶阴

性。通过以上实验逐步鉴别金黄色葡萄球菌和链球菌。

关键词：葡萄球菌；链球菌；触媒反应；凝固酶反应；甘露醇发酵

1.引言：材料与方法

1.1材料

1.1.1培养基：普通琼脂平板和血琼脂平板各两个。将高压蒸汽灭菌

的培养基降温到50℃左右，按30:3ml比例加入家兔的抗凝血，充分

混匀，在无菌条件下倒两个血平板。

1.1.2细菌：事先准备好A血平板和B两个接种好菌的平板，为实验

提供菌株。

1.2方法

1.2.1家兔心脏采血

针管事先抽取0.5ml柠檬酸钠溶液备用。动物左仰卧有助手保

定，在家兔左前肢腋下处局部剪毛消毒，在胸部心跳最明显处下针。

直刺心脏，感觉针头跳动或者有血液向针管内流动时，即可抽血5ml。

1.2.2血琼脂平板制作

将高压蒸汽灭菌的培养基降温到50℃左右，按30:3ml比例加入

家兔的抗凝血，充分混匀，在无菌条件下倒两个血平板。

1.2.3细菌的划线分离

将一个普通琼脂平板和血琼脂平板标上A，另外两个平板标上B。

在A培养基的菌挑选单个菌落无菌条件下划线接种到两个A平板中，

B培养基的菌挑选单个菌落无菌条件下划线接种到两个B平板中。在

37℃下培养24h。

图一：A型菌纯培养图二：B型菌纯培养

1.2.4革兰氏染色

将纯培养的A菌和B菌分别进行革兰氏染色。将染色好的装片在

显微镜下观察期颜色和形态。

图三：A菌革兰氏染色图四：B菌革兰氏染色

1.2.5触媒反应

将接种环灼烧灭菌，挑取B菌，将其放入盛有过氧化氢的试管中，

观察其反应。

图五:B菌触媒反应阳性

1.2.6凝固酶反应

用灼烧灭菌的接种环挑取B菌，将其放入凝固酶反应的塑料反应

观众，使其充分混合，反应24h。

图六：B菌凝固酶反应阳性

1.2.7甘露醇发酵

将甘露醇发酵管内甘露醇平均分配在管的两侧，在中间用到划一

个开口，小心掰开，标记号A和B。用灼烧灭菌的接种针分别挑取纯

培养的A菌和B菌放入A和B发酵管中，发酵24h。

2.结果与分析

细菌的划线分离.，A菌在血琼脂平板上出现β溶血环，在普通琼脂

平板上不能正常生长。B菌在两个平板上都能正常生长，在血琼脂平

板未出现溶血。初步估计A为链球菌，B为葡萄球菌。革兰氏染色A

和B菌均呈蓝紫色，A为短链状，B为葡萄串状，判断A为链球菌，B

为葡萄球菌。触媒反应中B菌能产生气泡，故B为葡萄球菌。凝固酶

反应中，B呈现阳性，故B为金黄色葡萄球菌。甘露醇发酵中A呈现

阴性，B呈现阳性，A为链球菌，B为葡萄球菌。

3.讨论

4.结论

经过以上实验得出结论，A型菌为链球菌，B型菌为致病性的金

黄色葡萄球菌。

[参考文献]

[1]