《微生物的营养》课件.pptVIP

*************************************选择性培养基麦康凯琼脂(MacConkeyAgar)含有胆盐和结晶紫，抑制革兰氏阳性菌生长用于肠道革兰氏阴性菌的分离和鉴定含有乳糖和中性红指示剂，可区分发酵乳糖和不发酵乳糖的菌种甘露醇盐琼脂(MSA)含有7.5%氯化钠，抑制大多数微生物的生长专门用于葡萄球菌的分离和初步鉴定含有甘露醇和酚红指示剂，可区分金黄色葡萄球菌和其他葡萄球菌沙氏葡萄糖琼脂(SDA)pH值约5.6，酸性环境抑制细菌生长用于真菌的分离和培养常添加抗生素以进一步抑制细菌污染选择性培养基通过添加特定的抑制剂(如抗生素、染料、高浓度盐等)或调整物理化学条件(如pH值)，抑制非目标微生物的生长，同时允许目标微生物正常生长。这类培养基在从复杂样品中分离特定微生物时非常重要，尤其是在病原微生物的临床诊断和食品卫生检测中。鉴别培养基血琼脂(BloodAgar)可区分溶血性和非溶血性细菌根据溶血类型(α、β或γ)鉴别不同的链球菌伊红美蓝琼脂(EMB)含有伊红和亚甲蓝指示剂可区分大肠杆菌(形成金属光泽的深紫色菌落)和其他肠杆菌三糖铁琼脂(TSI)含有葡萄糖、蔗糖、乳糖和指示剂可同时检测糖发酵、H2S产生和气体产生能力用于肠道菌的初步鉴定鉴别培养基含有特定的指示剂或反应物质，能够显示微生物的生化特性或代谢产物，从而区分不同的微生物。这类培养基通常通过颜色变化、沉淀形成或气体产生等方式直观地反映微生物的生化特性。鉴别培养基在微生物分类学和临床诊断中起着重要作用，可以快速初步鉴定未知菌株。有些培养基同时具有选择性和鉴别功能，如麦康凯琼脂既能选择性分离革兰氏阴性菌，又能区分发酵乳糖和不发酵乳糖的菌种。这类培养基在临床和环境微生物学中应用广泛。培养基的制备（一）配方选择根据目标微生物和研究目的称量配料精确称量各组分溶解混合充分搅拌确保溶解pH调整使用pH计精确调节灭菌通常采用高压蒸汽灭菌5培养基制备的基本原则包括选择适当的成分、精确测量、充分溶解、正确调节pH值和彻底灭菌。培养基的质量直接影响微生物的生长和实验结果，因此必须严格按照标准操作程序进行制备。在选择培养基配方时，应考虑目标微生物的营养需求、生长特性以及研究目的。对于常规培养，可使用商业化的脱水培养基粉末，按照说明书配制；对于特殊研究，则可能需要自行配制特定成分的培养基。无论何种情况，都应确保所有器具和操作环境的清洁，以避免污染。培养基的制备（二）称量原料使用分析天平精确称量各成分商品化培养基粉末按说明书用量配制溶解混合将成分加入适量蒸馏水中加热搅拌至完全溶解固体培养基需加热至琼脂完全溶化调整pH值使用pH计测量用NaOH或HCl溶液调至目标pH值考虑灭菌后pH可能的变化分装按需要量分装到适当的容器中试管类培养基一般不超过容积的1/3确保容器口干净避免灭菌后污染培养基制备过程中需注意多个关键步骤和注意事项。首先，原料应保持干燥并在有效期内。溶解过程中，应确保所有成分完全溶解，特别是琼脂类物质需充分加热溶化。pH值调整需在所有成分溶解后进行，且应考虑灭菌后pH可能下降0.1-0.2个单位。含有热敏成分(如糖类、抗生素)的培养基，应将这些成分单独灭菌或过滤除菌后，在培养基冷却到约50℃时再添加。分装时应避免培养基沾污容器口，以防灭菌后污染。对于平板培养基，倒板操作应在超净工作台内进行，以确保无菌环境。培养基的灭菌（一）121°C标准灭菌温度高压蒸汽灭菌的常用温度15-20灭菌时间(分钟)确保彻底杀灭所有微生物15压力(磅/平方英寸)约等于1.05公斤/平方厘米0.22过滤孔径(μm)过滤除菌常用滤膜孔径培养基灭菌是确保微生物纯培养的关键步骤，目的是杀灭或去除培养基中所有活的微生物，包括细菌、真菌、病毒和芽孢。灭菌不充分会导致杂菌污染，影响实验结果；而过度灭菌则可能破坏培养基中的营养成分，降低培养基质量。选择适当的灭菌方法应考虑培养基的性质、容量和组成成分。常用的灭菌方法包括高压蒸汽灭菌、干热灭菌、过滤除菌和辐射灭菌等。其中高压蒸汽灭菌是最常用且最有效的方法，适用于大多数培养基的灭菌。培养基的灭菌（二）高压蒸汽灭菌原理：利用高温高压蒸汽使微生物蛋白质变性死亡条件：121℃，15-20分钟，15磅/平方英寸压力适用于：大多数培养基，尤其是耐热培养基注意事项：容器不宜装得过满(不超过2/3容积)大容量培养基需延长灭菌时间灭菌后应缓慢降压，避免培养基溢出过滤除菌原理：利用多孔滤膜物理截留微生物条件：通常使用0.22μm孔径