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B50
DB1302
唐山市地方标准
DB1302/T374—2013
水产品中氯霉素检测技术规范
2013-11-15发布2013-12-15实施
唐山市质量技术监督局发布
DB1302/T374—2013
前言
本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。
本标准由唐山市质量技术监督局提出。
本标准起草单位:唐山市畜牧水产品质量监测中心。
本标准起草人:郑百芹、蒙君丽、张建民、葛怀礼、董李学、刘洋、周鑫、吴颖、肖琎、李玉文、
张荣华、牛惠超。
DB1302/T374—2013
水产品中氯霉素检测技术规范
1范围
本标准规定了水产品中氯霉素的胶体金免疫层析测定方法、酶联免疫吸附测定方法和高效液相色
谱-串联质谱测定方法。
本标准适用于水产品中氯霉素残留的快速集成检测。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单或修订版)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规则和试验方法
SC/T3016水产品抽样方法
农业部781号公告-2-2006动物源食品中氯霉素残留量的测定高效液相色谱-串联质谱法
农业部1025号公告-26-2008动物源性食品中氯霉素类残留检测酶联免疫吸附测定法
3抽样方法
按照SC/T3016执行。
4胶体金免疫层析法
4.1适用范围
本方法适用于水产品中氯霉素的快速筛选检测,最低检测浓度1µg/kg。
4.2方法原理
胶体金快速检测试纸条采用竞争抑制免疫层析原理。若样品中含有氯霉素,氯霉素与金标抗体相
结合,封闭金标抗体上的抗原结合点,阻止金标抗体与纤维素膜上氯霉素偶联物结合,显色较弱或不
显色;若样品中不含有氯霉素,则不能阻止金标抗体与纤维素膜上的氯霉素偶联物结合,显色较强。
4.3试剂和材料
以下所用的试剂,除特别注明外均为分析纯试剂,水为符合GB/T6682规定的三级水。
4.3.1吸管、缓冲液、氯霉素检测条(试剂盒自带),4℃~30℃阴凉避光干燥处储存。
4.3.2乙酸乙酯
4.3.3正己烷
4.4仪器和设备
4.4.1组织匀浆机
4.4.2天平:感量(0.01g)
4.4.3振荡器或混旋器
4.4.4微量移液器:单道20µL~200µL、100µL~1000µL
4.4.5计时器
4.4.6吹风机
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DB1302/T374—2013
4.5样品前处理
称取已均质样品1g(±0.05g)于l5mL离心管中,加入1mL乙酸乙酯,振荡器震荡混匀,静置5min;
移液枪吸取澄清液(约300µL~400µL)于50mL锥底离心管中,吹风机冷风吹干;用0.3mL正己烷溶解
残渣,加入0.3mL缓冲液,振荡器振荡1min,静置3min,供测试用。
4.6检测和结果判定
4.6.1检测
取出检测条,平放,用移液枪或塑料吸管取待测液80µL(2~3滴)于加样孔,10min~15min
内观察结果,目测检测线。
4.6.2结果判定
结果判定如图1所示。其中C线为质控线,T线为检测线。
4.6.2.1C线和T线均呈现肉眼可见红色线为阴性
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