《病毒学入门：流感》课件.pptVIP

*************************************流感与普通感冒的区别特征流感普通感冒发病速度突然发病逐渐发病发热高热（通常≥38.5℃），持续3-4天低热或无发热全身症状显著的疲劳、肌肉酸痛、头痛轻微或无全身症状呼吸道症状干咳为主，鼻塞、流涕不明显鼻塞、流涕显著，咳嗽较轻病程一般1-2周，疲劳可持续数周通常3-7天并发症常见，包括肺炎、心肌炎等少见，主要为鼻窦炎、中耳炎治疗抗病毒药物有效（早期使用）主要是对症治疗流感的实验室研究病毒培养实验室中培养流感病毒通常使用MDCK（Madin-Darby犬肾细胞）或鸡胚。这些系统允许病毒复制，产生足够的病毒颗粒用于研究。在BSL-2或BSL-3实验室中进行，取决于病毒株的危险性。培养的病毒可用于抗原性分析、药物敏感性测试和疫苗开发。基因工程利用反向遗传学技术，科学家可以从克隆的DNA构建流感病毒。这种技术允许精确修改病毒基因组，研究特定基因突变对病毒复制、致病性和传播能力的影响。基因工程还用于开发减毒活疫苗和研究病毒适应性进化。动物模型小鼠、雪貂和非人灵长类是研究流感的主要动物模型。雪貂特别有价值，因其对人流感病毒的易感性和类似人类的临床表现。动物模型用于研究病毒传播、致病机制、疫苗效力和抗病毒药物评价，是从体外研究向临床应用过渡的关键环节。反向遗传学技术技术原理通过体外合成cDNA，逆向构建RNA病毒1操作步骤克隆、体外转录和细胞转染，产生重组病毒2关键应用基因功能研究、疫苗开发和基因治疗技术3反向遗传学技术是现代流感病毒研究的基石，它颠覆了传统从RNA病毒到DNA的研究思路，而是从人工合成的DNA出发，构建RNA病毒。对于流感病毒这种具有分段基因组的病毒，通常需要同时转染表达8个基因片段的质粒。这项技术使科学家能够精确控制病毒基因组，研究单点突变对病毒特性的影响，如H5N1禽流感病毒中哪些特定突变可能增加其在哺乳动物间传播的能力。此外，反向遗传学也是现代流感疫苗生产的关键技术，可快速生成与预测流行株匹配的疫苗病毒株，大大缩短了疫苗生产时间。然而，这项强大技术也带来了生物安全隐忧，需要严格的实验室管理和伦理监督。流感病毒的宿主适应性宿主屏障流感病毒跨种传播面临多重宿主屏障，包括病毒受体特异性、复制效率和免疫逃逸能力等。不同动物细胞表面的唾液酸受体类型和分布不同，这是决定病毒宿主范围的首要因素。禽类细胞主要表达α-2,3连接的唾液酸，而人类上呼吸道主要表达α-2,6连接的唾液酸。关键适应性突变病毒从一个宿主跳跃到另一个宿主通常需要一系列适应性突变。HA蛋白中的特定氨基酸突变可改变受体结合特异性；PB2等多聚酶复合物基因的突变影响病毒在不同温度下的复制效率；NS1基因突变可调节对宿主免疫反应的抑制能力。这些突变可能通过自然选择或重配事件积累。中间宿主猪被认为是流感病毒的理想混合容器，因为猪细胞同时表达α-2,3和α-2,6连接的唾液酸受体，可同时感染人源和禽源流感病毒。这为不同来源病毒的基因重配创造了条件，可能产生具有新组合特性的病毒。2009年H1N1大流行病毒就是猪、禽和人流感病毒基因重配的结果。流感病毒的进化分子进化流感病毒具有极高的进化速率，每年每个核苷酸位点突变率约为1.8×10^-3。RNA依赖的RNA聚合酶缺乏校对功能，导致复制错误率高。病毒的抗原位点承受来自宿主免疫系统的强大选择压力，促使病毒快速进化以逃避免疫识别。针对表面糖蛋白的中和抗体是主要选择力量。系统发生分析通过比较不同病毒株的基因序列，科学家可以构建流感病毒的进化树，追踪病毒的传播路径和溯源。系统发生分析揭示了流感病毒的季节性变异模式和地理传播规律。这些分析表明，新的季节性流感病毒株通常起源于东亚和东南亚地区，然后向全球传播。抗原进化抗原制图技术可视化展示不同病毒株之间的抗原关系，帮助追踪病毒的抗原演变。抗原分析表明，流感病毒通常表现为阶段性进化模式，而非连续渐变。这种分步进化模式可能与优势表位突变的替代选择有关，有助于理解流感疫苗更新的时机和必要性。全球流感监测WHO全球流感监测与应对系统世界卫生组织（WHO）创建的全球流感监测与应对系统（GISRS）由超过140个国家的实验室网络组成。它有三个主要功能：监测季节性流感活动和变异；发现和评估新型流感病毒；推荐季节性疫苗组分。该系统包括国家流感中心、WHO合作中心、必要管制实验室和H5参考实验室。各成员实验室共享病毒样本和数据，形成全球早期预警网络。中国流感监测网络中国国家流感中心（CNIC）是WHO全球流感监测网络的重要成员。中国建立了覆