《中成药中添加吡罗昔康药物的快速检测方法-拉曼光谱法》征求意见稿.docxVIP

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T/FDSAXXXX.4—202X

中成药中添加吡罗昔康药物的快速检测拉曼光谱法

1范围

本标准规定了中成药中添加吡罗昔康药物的快速检测方法。

本标准适用于中药粉、中药制剂、中药胶囊中添加吡罗昔康药物的快速检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成对本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

不同物质具有与其分子结构相对应的特征拉曼光谱。一般样品经稀释，复杂样品经液液萃取，加表面增强试剂对信号增强，进行拉曼光谱扫描。与标准谱图库中的吡罗昔康特征拉曼位移（827cm-1±3cm-1,876cm-1±3cm-1,1541cm-1±3cm-1）进行匹配识别，对样品中的吡罗昔康进行定性判定。

5试剂和材料

5.1试剂

除另有规定外，试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

5.1.1乙酸乙酯，色谱纯。

5.1.2甲醇，色谱纯。

5.1.3色素净化管：2mL离心管配比：0.12g无水硫酸镁+0.04g石墨化炭黑。

5.1.4碱化试剂：准确称取8g氢氧化钠，用水定容至100mL

5.1.5酸化试剂：0.5mol/L硫酸水溶液。

5.1.6促凝剂：称取5.85g氯化钠，溶于100mL水中，摇匀，备用，或配制成其他相当的无机盐溶液。

5.1.7表面增强试剂：纳米金溶胶或相当者。避光，4℃~20℃保存，有效期6个月。

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注：表面增强试剂的参考配制方法：纳米金溶胶：取100mL0.01%氯金酸（AuCl3·HCl·4H2O）水溶液

加热至沸，剧烈搅拌下准确加入1.0mL1%柠檬酸三钠（Na3C6H5O7）水溶液，金黄色的氯金酸水溶液在2min内变为红色，继续煮沸15min，冷却后用蒸馏水补加到100mL。

5.1.8吡罗昔康标准品：C15H13N3O4S，CAS号：36322-90-4，纯度≥98%。

5.1.9吡罗昔康标准溶液：准确称取标准物质0.1000g，甲醇（HPLC）准确定容至100mL。保证配制样本浓度为1mg/mL，于4℃避光保存，有效期1个月。

5.2材料

5.2.1塑料具塞离心管：2mL和10mL。

5.2.2移液吸头：200μL，1000μL和5000μL。

6仪器设备

6.1便携式拉曼光谱仪

稳频激光光源：发射波长为785±1nm，线宽0.1nm，能量≥250mW；光谱分辨率≤

10cm-1；光谱响应范围300cm-1~2700cm-1，或大于该响应范围。

6.2移液器：100μL、1000μL和5000μL。

6.3涡旋振荡器。

6.4离心机：转速≥10000r/min。

6.5电子天平：感量为0.01g和感量为0.0001g。

7分析步骤

7.1提取

7.1.1胶囊、粉类样品

取待测样品内部粉末0.5g，倒入10mL离心管中；向离心管中加入3000μL乙酸乙酯，涡旋振荡1分钟，静置1分钟，取1500μL上清液于2mL离心管中，10000转/分钟离心30秒；取1000μL离心后清液于色素净化管中，振荡混匀，10000转/分钟离心30秒；取离心后液体800μL于2mL离心管，向其中加入600μL去离子水和200μL碱化试剂，振荡10秒后，10000转/分钟离心10秒，取离心后下层液体600μL于2mL离心管，向其中加入400μL酸化试剂和500μL乙酸乙酯，振荡混匀，10000转/分钟离心10秒，取上层清液待测。

7.1.2药丸类样品

将待测样品用洁净容器破碎后取0.5g，倒入10mL离心管中；向离心管中加入3000μL乙酸乙酯，涡旋振荡1分钟，静置1分钟，取1500μL上清液于2mL离心管中，10000转/分钟离心30秒；取1000μL离心后清液于色素净化管中，振荡混匀，10000转/分钟离心30秒；取离心后液体800μL于2mL离心管，向其中加入600μL去离子水和200μL碱化试剂，振荡10秒后，1